[发明专利]一种检测人类ESR1基因突变的试剂盒

权利要求书

1.一种检测人类ESR1基因突变的试剂盒，包括组分甲、组分乙和组分丙；

所述组分甲包括封闭序列甲和引物对甲；

所述封闭序列甲为单链DNA分子，其中若干核苷酸发生了锁核酸修饰；

所述封闭序列甲的核苷酸序列如序列表中的序列2所示；

所述若干核苷酸发生了锁核酸修饰为序列2所示核苷酸序列自5’端起第5位、第9位、第14位、第17位、第19位、第22位、第26位、第31位、第36位、第41位、第45位、第48位、第50位、第54位和第58位碱基发生锁核酸修饰；

所述引物对甲由用于扩增特异DNA片段甲的两条引物组成；所述特异DNA片段甲中具有靶序列甲；所述靶序列甲为人类基因组中上游引物F1和下游引物R1组成的引物对甲的靶序列；

所述上游引物F1为序列表的序列3所示的单链DNA分子；

所述下游引物R1为序列表的序列4所示的单链DNA分子；

所述组分乙包括封闭序列乙和引物对乙；

所述封闭序列乙为单链DNA分子，其中若干核苷酸发生了锁核酸修饰；

所述封闭序列乙的核苷酸序列如序列表中的序列6所示；

所述若干核苷酸发生了锁核酸修饰为序列6所示核苷酸序列自5’端起第3位、第7位、第10位、第15位、第20位、第23位、第26位、第29位、第33位、第36位、第40位、第43位、第48位、第53位和第57位碱基发生锁核酸修饰；

所述引物对乙由用于扩增特异DNA片段乙的两条引物组成；所述特异DNA片段乙中具有靶序列乙；所述靶序列乙为人类基因组中上游引物F2和下游引物R2组成的引物对乙的靶序列；

所述上游引物F2为序列表的序列7所示的单链DNA分子；

所述下游引物R2为序列表的序列8所示的单链DNA分子；

所述组分丙包括封闭序列丙和引物对丙；

所述封闭序列丙为单链DNA分子，其中若干核苷酸发生了锁核酸修饰；所述封闭序列丙的核苷酸序列如序列表中的序列10所示；

所述若干核苷酸发生了锁核酸修饰为序列10所示核苷酸序列自5’端起第4位、第8位、第12位、第16位、第20位、第25位、第28位、第31位、第35位、第39位、第44位、第47位、第51位、第55位、第58位和第 61位碱基发生锁核酸修饰；

所述引物对丙由用于扩增特异DNA片段丙的两条引物组成；所述特异DNA片段丙中具有靶序列丙；所述靶序列丙为人类基因组中上游引物F3和下游引物R3组成的引物对丙的靶序列；

所述上游引物F3为序列表的序列11所示的单链DNA分子；

所述下游引物R3为序列表的序列12所示的单链DNA分子。

2.权利要求1所述试剂盒的制备方法，包括将所述封闭序列甲、所述上游引物F1、所述下游引物R1、所述封闭序列乙、所述上游引物F2、所述下游引物R2、所述封闭序列丙、所述上游引物F3、所述下游引物R3分别单独包装的步骤。

3.权利要求1所述试剂盒在制备产品中的应用；所述产品的功能为如下b1）或b2）：

b1）鉴定或辅助鉴定待测组织是否为肿瘤组织；

b2）鉴定或辅助鉴定待测患者是否为癌症患者。

4.鉴定或辅助鉴定待测组织是否为或候选为肿瘤组织的方法，包括如下步骤：采用权利要求1所述的试剂盒分别对待测组织和正常组织进行偏向扩增，然后进行如下判断：

如果所述待测组织的扩增产物与正常组织的扩增产物的核苷酸序列一致，则所述待测组织不为或候选不为肿瘤组织；

如果所述待测组织的扩增产物与正常组织的扩增产物的核苷酸序列不一致，则所述待测组织为或候选为肿瘤组织；

所述方法为非疾病诊断和治疗的方法。