[发明专利]一种沸石基负载型仿酶催化剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种沸石基负载型仿酶催化剂的制备方法，其特征在于，具体步骤为：

（1）先将活性组分的盐类1-5g和5-20ml的水，搅拌10-30min，配制成活性组分溶液；

（2）将沸石加入上述溶液中，室温搅拌4-6h，得到均匀的悬浮液；沸石的量为活性组分量的3-20倍；

（3）将上述悬浮液用红外灯完全烘干或者用烘箱干燥；

（4）最后，将干燥的样品于500℃-900℃空气中煅烧2-4小时，即得到沸石基负载型仿酶催化剂。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的活性组分选自金属氧化物V₂O₅、Fe₃O₄、CuO、TiO₂或CeO₂。

3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的沸石选自ZSM-5沸石、丝光沸石、beta沸石、镁碱沸石或Y型沸石。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，活性组分的用量为沸石基底质量的1%~30%。

5.根据权利要求1、2或4所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）中煅烧温度为500℃-600℃，煅烧时间2-4h。

6.由根据权利要求1-5之一所述制备方法得到的沸石基负载型仿酶催化剂。

7.如权利要求6所述的沸石基负载型仿酶催化剂在检测葡萄糖检测中应用，是用分光光度法进行催化剂的仿酶测试，考察显色剂和双氧水的比色反应，然后针对H₂O₂和葡萄糖的检出限LOD进行测试；具体步骤如下：

（1）将仿酶催化剂用乙酸盐缓冲液配制成浓度为0-2 mg‧ml^-1悬浮液，超声分散，取100-300μl的悬浮液于离心管中进行测试；

（2）加入2-3ml乙酸盐缓冲液以达到比色皿2/3以上的量；

（3）加入0-30%的双氧水和0-100mM的显色剂，反应5-10min之后用紫外分光光度计测试A-λ曲线，记录652 nm处ox-显色剂吸收峰的吸光度；

（4）对于H₂O₂检出限的测试，在步骤（1）、（2）培制的含有仿酶催化剂和乙酸盐缓冲液的溶液中，加入0-100mM的显色剂，固定H₂O₂的浓度在0-100mM范围内，从零点开始，逐渐增加双氧水浓度，进行A-λ测试，记录每组数据652 nm处的吸光度A，然后拟合对应双氧水浓度下的A-C（H₂O₂）工作曲线；根据工作曲线的斜率得到计算检出限所需要的灵敏度k，然后测试20组空白实验所对应的相对偏差σ，由检出限公式LOD=3σ/k计算出对应双氧水的检出限；

对于葡萄糖检出限的测试，首先将1-2g葡萄糖用10-100mlPBS缓冲液不断稀释，配制成浓度为0-100mM的溶液；然后加入1-2mg的GOx，在37℃水浴培养一段时间，待葡萄糖完全分解之后，加入100-300μl仿酶催化剂、2-3ml乙酸盐缓冲液，再加入浓度为0-100mM的显色剂，在37℃水浴培养1-2h；然后测试浓度范围0-100mM的葡萄糖溶液的A-λ曲线，记录每组数据652 nm处的吸光度A；拟合对应葡萄糖浓度下的A-C（葡萄糖）工作曲线；根据工作曲线的斜率计算检出限所需要的灵敏度k，然后测试10-20组空白实验所对应的相对偏差σ，由检出限公式LOD=3σ/k，计算出对应葡萄糖的检出限。

8.根据权利要求7所述的沸石基负载型仿酶催化剂在检测葡萄糖检测中应用，其特征在于，所述的显色剂为3,3',5,5'-四甲基联苯胺、邻苯二胺2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐）。