[发明专利]固相萃取样品前处理装置及处理方法

说明书

本发明公开了固相萃取样品前处理装置及处理方法。该装置包括一柱状活塞以及筒状容器；所述柱状活塞包括活塞主体、收集容器、填料柱、导流管以及顶盖；所述活塞主体与所述筒状容器密封配合；所述收集容器位于所述活塞主体内，所述收集容器的顶端具有开口并由所述顶盖封闭；所述填料柱设于所述活塞主体内，所述填料柱的底端与所述活塞主体的底端连通并设有开口；所述填料柱的顶端通过所述导流管与所述收集容器连通；所述填料柱内填充有线性填料，所述线性填料沿所述填料柱的轴线由所述填料柱底端开口填充到所述填料柱内并平行排列。本发明所述固相萃取样品前处理装置及处理方法，可以处理微量的样品，且分离效率较高，且普适性强，使用溶剂量少。

技术领域

本发明涉及萃取技术领域，具体涉及固相萃取样品前处理装置及其使用方法。

背景技术

化学分析过程中绝大多数情况都必须对样品进行前处理，将待测物从样品中分离出来并加以浓缩，目的是消除样品基底物质对分析检测的干扰和提高分析灵敏度和准确度。最常用的样品处理方法主要有三类：固相萃取、液-液萃取、沉淀分离。针对不同样品一般需要开发特定前处理装置，建立一个完整的分析方法的最花时间的环节往往就是样品前处理的开发，而完成一个样品的分析最费时费力的步骤往往也是样品前处理。

固相萃取是将样品通过一个固相萃取柱，样品中的待测物质吸附在萃取柱的填充材料上，然后用合适的缓冲液将样品中的干扰物质从萃取柱上冲洗除去，最后在用合适的溶剂或缓冲试剂将待测物从萃取柱上洗脱下来并收集。所得萃取溶液一般需要蒸干，干渣用少量溶剂复溶之后才上机检测。相对于其它样品前处理技术，固相萃取得到越来越广泛的应用，关键是因为它溶剂用量少，过程容易实现自动化，而且市场上有非常多种类的萃取柱可供选择，比较难以分离提取的样品一般总能找到合适的固相萃取柱进行前处理。但是，无论固相萃取方法开发还是萃取操作过程都很费时费事，从大量不同品种的萃取柱中找到最合适某种样品的萃取柱更是一个繁复甚至不可能的过程。

现有的固相萃取填料基本分为有机类和硅胶类，两者都是将填料制成微粒状填充到塑料柱中，微粒越细分离效果越好，但价钱越贵，柱压也越高。颗粒填料的粒子直径与分离效率之间的关系存在有两个竞争因素：一方面微越粒细小比表面越大，待分离物质在柱内可以发生更多的吸附-解吸附过程，从而提高分离效率；另一方面微粒越细颗粒之间的界面越多，待分离物质通过分离柱时就要经历更多的界面转移，每次转移都让待分离物有机会在溶剂中自由扩散，从而降低分离效率。综合考虑成本及缩小填料的微粒直径所能获得的分离效率的提高幅度，现有固相萃取产品很少采用粒径50微米以下的填料。正因如此，固相萃取技术的发展基本上只局限于对填料的化学组成的研发，其它方面很少有发展的余地。

样品前处理在血液中药物浓度分析中尤其具有挑战性，因为血样量通常较小，药物动力学小鼠实验时每次甚至只能取几十微升血，绝大多数情况下只能离心分离血样中的细胞后用蛋白沉淀法做样品前处理，得到的回收率有时只有10％左右，而样品中的血脂血糖等最可能干扰质谱定量分析的物质很难排除。如果用现有的固相萃取分离柱去处理微量血样，首先必须花费大量时间摸索条件筛选萃取柱和溶剂，得到的萃取液一般在1毫升以上，必须蒸干复溶，否则稀释比太大，最后得到的回收率极少达到90％以上，常常只有50％以下。

然而，血药浓度分析是治疗药物个性化用药的关键环节，为了确定一个药物在某一患者身上的吸收与代谢情况，在患者用药后必须测定几个时间点患者血液中的药物浓度。如果对大部分药物推行个性化用药，以达到精准医疗的目的，再大的医院也不可能容纳得了等候取血的患者，更不可能用现有的固相萃取柱对所有血样一一处理。唯一可能解决的办法是让患者自己采集指尖血，即时做完血样处理，然后直接送检。最理想就是有一种适应于所有药物萃取的固相萃取柱，不需要初始化，能把蛋白和血糖血脂等干扰物牢固吸附，用少量溶剂直接冲洗吸附了样品的萃取柱就可以得纯待测物，而且回收率达到90％以上。本发明正是旨在提供一种具备上述功能的线性填充固相萃取柱，用以处理一滴血(5～50微升)，全血或血清的分析前处理。

发明内容