[发明专利]混合在水和有机溶剂中的样品浓缩、脱盐方法

说明书

技术领域

本发明涉及浓缩和脱盐技术领域，特别涉及一种混合在水和有机溶剂中的样品浓缩、脱盐方法。

背景技术

反相液相色谱制备分离纯化后的样品是纯化样品和流动相的混合溶液，纯化样品含量大多很低，流动相体积大且成份复杂，流动相中通常含有机溶剂和水，有的甚至含酸、碱或盐等。样品浓缩大多采用低压蒸馏（旋转蒸发）和/或冷冻干燥。稳定样品通常会直接采用低压蒸馏浓缩：用低压蒸馏方法浓缩，开始时浓缩速度较快，但随着有机溶剂的减少，水比例越来越高，浓缩速度就越来越慢，提高蒸发温度后，纯化样品又有被破坏的可能。如果流动相中还含有酸、碱或盐，用低压蒸馏方法也无法除去；不稳定样品大多先采用低压蒸馏去除有机溶剂后再用冷冻干燥浓缩：采用冷冻干燥的方法处理大量的又含有有机溶剂的样品不现实，而且冷冻干燥也没法除去其中的酸、碱或盐。以上二种方法浓缩样品均耗时耗能工作量大，尤其是水比例高的混合溶液；样品的脱盐目前大多采用离子交换法，但是离子交换法脱盐工艺繁琐，操作不便；所以样品的浓缩和脱盐在现实中还是一个难题。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的问题，本发明提供一种混合在水和有机溶剂中的样品浓缩、脱盐方法，仅需简单的操作便可将样品浓缩10倍以上，并能够实现脱盐，同时把以水为主的溶液替换成有机溶剂为主，为后续的干燥带来极大的方便。

技术方案：本发明提供了一种以水和少量有机溶剂作为混合溶剂的混合溶液的浓缩、脱盐方法，包括以下步骤：

（1）低压蒸馏所述混合溶液以去除其中部分有机溶剂得A液；

（2）将所述A液注入反相液相色谱柱，若所述混合溶液中无酸、碱和/或盐，则使用纯有机溶剂对所述反相液相色谱柱进行洗脱，洗脱至目标产品出峰后开始收集有机溶剂洗脱液，直至所述目标产品的峰消失时停止收集；若所述溶液中有酸、碱和/或盐，则先使用含有少量有机溶剂的水溶液对所述反相液相色谱柱进行冲洗，以去除其中的酸、碱和/或盐，然后再使用纯有机溶剂对所述反相液相色谱柱进行洗脱，洗脱至目标产品出峰后开始收集有机溶剂洗脱液，直至所述目标产品的峰消失时停止收集；（3）低压蒸馏收集到的所述有机溶剂洗脱液以去除其中的有机溶剂，干燥后得浓缩的目标产品。

进一步地，在所述步骤（2）中，所述含有少量有机溶剂的水溶液中，所述有机溶剂的浓度为2~10%。

进一步地，所述有机溶剂为甲醇或乙腈。

有益效果：本方法针对的是以水和有机溶剂作为混合溶剂且其中有机溶剂含量较少的混合溶液的浓缩、脱盐，对于不含有酸、碱和/或盐的混合溶液，只需要经过低压蒸馏去除其中部分有机溶剂，然后将混合溶液注入反相液相色谱柱对其进行纯有机溶剂洗脱，纯有机溶剂洗脱的目的是去除混合溶液中的水（因为后续蒸发有机溶剂比蒸发水容易的多），以将目标产品溶于有机溶剂中，洗脱至目标产品出峰后开始收集有机溶剂洗脱液，直至所述目标产品的峰消失时停止收集（仅仅收集含有目标产品的有机溶剂洗脱液，有效提升浓缩效率），最后低压蒸馏含有目标产品的有机溶剂洗脱液去除有机溶剂（此时仅仅需要蒸发有机溶剂即可，有机溶剂易挥发的特性使得此步骤比较节省时间），干燥后即得目标产品；对于含有酸、碱和/或盐的混合溶液，先要低压蒸馏去除有机溶剂，接着使用含有少量有机溶剂的水溶液对注入反相液相色谱柱的混合溶液进行冲洗以去除其中的酸、碱和/或盐，然后使用纯有机溶剂洗脱，以去除其中的水并将目标产品溶于有机溶剂中，最后对含有目标产品的有机溶剂洗脱液进行低压蒸馏去除其中的有机溶剂，干燥后即得浓缩的目标产品。可见，与现有技术中直接使用低压蒸馏和冷冻干燥的方法对混合溶液进行浓缩、脱盐相比，本方法的浓缩效率较高，脱盐工艺简单易操作，大大缩短了浓缩、脱盐的时间。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细的介绍。

实施方式1：

样品：米尔贝肟样品。

制备色谱条件：流动相为浓度为85%的甲醇水溶液，反相液相色谱柱采用30*250，C18，10u不锈钢柱，流量45ml/min。

将纯度符合要求的米尔贝肟样品共 6000ml 先在45℃下低压蒸馏去除其中部分甲醇，使体积减少至大约3000ml，冷却后用泵注入到已冲洗干净并用50%甲醇平衡过的反相液相色谱柱内，用时约70min，注完后用纯甲醇洗脱，洗脱至米尔贝肟出峰后开始收集甲醇洗脱液，直至米尔贝肟的峰消失，共收集到约 150ml 甲醇洗脱液，最后再低压蒸馏收集到的甲醇洗脱液得干燥的米尔贝肟样品约4g。

实施方式2：

样品：雌酮样品。