[发明专利]PD‑1H激动剂在哮喘治疗中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种预防或治疗对象的哮喘的方法。本发明还涉及PD-1H激动剂在制备用于预防或治疗对象的哮喘的药物组合物中的应用。

背景技术

哮喘是一张常见的气道慢性炎症性疾病，研究显示CD4⁺Th2细胞在疾病的诱导、机制和进展中扮演至关重要的角色。哮喘中Th2型反应的标志是嗜酸性粒细胞性气道炎症，伴随粘液分泌、气道重塑和超反应性。IL-5和IL-13对于哮喘的病理生理学非常重要。IL-5具有多重作用，包括直接激活嗜酸性粒细胞、影响粘附以及诱导趋化因子和炎症调节因子的合成。IL-13主要影响支气管超反应性、炎症和气道重塑。而且，IL-13驱动上皮细胞成熟和粘液生成、促使细胞外基质蛋白合成以及增强气道平滑肌细胞的收缩性。但是，哮喘发病期间细胞因子生成的调节机制尚不清楚。最近的研究集中在阻断这些细胞因子与其受体相互作用而作为哮喘的治疗途径。

PD-1H(也称为Gi24、VISTA、DD1α、Dies1)是B7/CD28免疫调节基因家族的细胞表面分子。PD-1H免疫球蛋白V区与CD28成员的比对发现它与PD-1蛋白具有最高的一致性。PD-1H组成型地表达于大多数造血细胞，包括淋巴细胞(B细胞除外)和骨髓细胞。一系列的证据支持PD-1H作为T细胞上的共抑制受体限制 T细胞活化，而表达于抗原提呈细胞(APCs)上的PD-1H却与T细胞上的未知受体相互作用而抑制T细胞反应。一项近期研究显示，不同细胞之间PD-1H/PD-1H 相互作用(亲同种相互作用)可能促进死亡细胞的巨噬细胞介导的清除作用以及 T细胞抑制。PD-1H敲除(KO)小鼠在多种小鼠模型中都发展出严重的炎症疾病和自身免疫疾病，表明PD-1H在T细胞免疫抑制中起作用。另一方面，抗小鼠 PD-1H的激动型单克隆抗体(mAb)能够在半同种异体的或全同种异体的鼠模型中抑制T细胞介导的急性肝炎并阻止急性移植物抗宿主疾病(GVHD)，导致治疗后呈完全嵌合状态。PD-1H在T细胞反应的抑制方面的作用显得可分为两个阶段：前期事件是抑制同种异体反应供体T细胞的激活，后期事件是促进供体Treg扩张。虽然PD-1H能够抑制CD4+T细胞对抗原的反应，但其在Th2样反应(特别是疾病状态下)的作用仍然未知。

发明内容

在本发明中，发明人采用PD-1H KO小鼠和可溶性PD-1H融合蛋白评价了PD-1H 在鸡卵清蛋白(OVA)诱导的过敏性气道炎症中的作用。研究发现，PD-1H是Th2 T细胞反应的重要调节因素。而且，这些研究支持PD-1H激动剂作为人类哮喘的治疗剂。

在本发明的一个方面，本发明提供一种预防或治疗对象的哮喘的方法。该方法包括向有需要的对象施用治疗有效量的PD-1H激动剂。

在本发明的另一个方面，本发明提供PD-1H激动剂在制备用于预防或治疗对象的哮喘的药物组合物中的应用。

在本发明的一些实施方式中，所述哮喘是Th2介导的哮喘。在一些实施方式中，所述施用通过静脉内方式给药。在本发明的一些实施方式中，所述PD-1H激动剂是抗PD-1H的激动型单抗。

利用PD-1H缺陷型小鼠品系和重组PD-1H-Ig融合蛋白，发明人发现PD-1H缺陷或通过可溶性PD-1H可阻断PD-1H与其配体的结合能够而大大增加气道中浸润性炎症的累积，其中嗜酸性粒细胞是其主要的细胞成分。BALF含有升高水平的 Th2型细胞因子，包括IL-5和IL-13以及先天性炎症细胞因子MCP-1和IL-6，并且Th2样CD4⁺T细胞升高，Treg降低，表明PD-1H在实验性哮喘进展中作为气道炎症控制的负调节因子。

附图说明

图1.PD-1H KO小鼠在OVA诱导的哮喘模型中发展出严重的肺部炎症和粘液分泌。(a)诱导实验性哮喘的实验方案：在第0天和第5天，给WT和PD-1H KO 小鼠腹腔注射混合有4mg氢氧化铝凝胶的20μg OVA来免疫，随后通过气溶胶滴注法连续3天(12–14)以1％OVA(15ml/20min/天)激发。小鼠在第15天处死以进行分析。(b,c)收集BALF，染色进行白细胞计数。(d)肺石蜡切片染色。 (e)肺石蜡切片PAS染色，以观察粘液分泌型杯状细胞。图1b、1d和1e中的标尺为100μm。*P<0.05,**P<0.01(双尾Student’s t-test)。所有值表示为均值±s.e.m。N＝8/组。所有实验至少重复3次。