[发明专利]一种血清中尿素氮肌酐含量近红外光谱测定方法

说明书

技术领域

本发明属于血液检测领域，涉及一种血清中尿素氮肌酐含量的测定方法，尤其涉及一种血清中尿素氮肌酐含量近红外光谱测定方法。

背景技术

尿素是人体蛋白质代谢的主要终末产物，肌酐是肌肉在人体内代谢的产物，尿素和肌酐均主要由肾小球滤过排出体外，故可用作肾小球滤过功能的诊断和过筛指标，当肾小球滤过功能减低时，血肌酐和尿素氮因滞留而增高。

目前，临床实验室血和尿中肌酐的测定常用酶法或碱性苦味酸法(Jaffe法)。其中，Jaffe法虽然试剂较便宜，重复性、准确性也较好，但易受血清中其他假性肌酐物质的干扰，尤其是当血清胆红素值≥165.5μmol/L时开始出现负偏差。此外，头孢类和维生素C及多巴胺等药物也使其结果出现较大干扰。

酶法利用肌酐在肌酐酰氨基水解酶、肌酸脒基水解酶、肌氨酸氧化酶、过氧化物酶等酶及显色剂和水、氧的共同作用下生成醌亚胺(红色)，在505nm波长下测定其吸光度A，其A值的大小和样品中肌酐的含量成正比。由于酶本身具有的特性，肌酐酰氨基水解酐在反应中仅针对肌酐而不受其他物质的干扰，这使得测定结果接近于真实值。

血清(或血浆)中的尿素氮，在尿素氮试剂的酸性环境中与二乙酰-肟(DAM)共沸后，可缩合成一红色化合物，称为fearon反应。其颜色的深浅与血清(或血浆)中尿素氮的含量成正比，与同样处理的尿素氮标准液比色，即可测算出血清(或血浆)中尿素氮的含量。由于此方法干扰性大，目前临床实验室多采用尿素酶偶联法，用尿素酶分解尿素产生氨，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下使NADH氧化为NAD⁺时，通过340nm吸光度的降低值可计算出尿素氮含量。

发明内容

本发明提供一种血清中尿素氮肌酐含量近红外光谱测定方法，以克服现有技术的缺陷。

为实现上述目的，本发明提供一种血清中尿素氮肌酐含量近红外光谱测定方法，步骤一、配制若干个含有不同尿素氮含量和肌酐含量的血清标定液；步骤二、用近红外光谱仪对每个血清标定液进行光谱采集；步骤三、根据血清标定液的近红外光谱以及尿素氮和肌酐的含量，分别建立尿素氮鉴别模型和肌酐鉴别模型；步骤四、用近红外光谱仪对待检测的血清样品进行光谱采集，将血清样品的光谱分别与尿素氮鉴别模型和肌酐鉴别模型对比，获得血清样品中的尿素氮含量和肌酐含量。

其中，步骤一中，血清标定液是指已知其尿素氮含量和肌酐含量的血清样品，若干个血清样品之间尿素氮含量彼此不同，若干个血清样品之间肌酐含量彼此不同。同时，血清标定液的数量需满足建立模型的要求。

步骤三中，尿素氮鉴别模型是指血清标定液的光谱与血清标定液中尿素氮含量之间的对应关系，肌酐鉴别模型是指血清标定液的光谱与血清标定液中肌酐含量之间的对应关系。

进一步，本发明提供一种血清中尿素氮肌酐含量近红外光谱测定方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤一是采用生化分析仪或检测试剂盒测定血清中的尿素氮含量和肌酐含量，并配制出不同尿素氮含量和肌酐含量的血清标定液。

其中，上述血清可以为采集而来的多份血清，用以配制血清标定液。生化分析仪是指可检测血液中尿素氮和肌酐含量的仪器，检测试剂盒是指市售的可检测血液中尿素氮和肌酐含量的产品。

进一步，本发明提供一种血清中尿素氮肌酐含量近红外光谱测定方法，还可以具有这样的特征：其中，步骤二和步骤四中，使用近红外光谱仪检测血清标定液和血清样品时，还采用配合近红外光谱仪的液体检测装置；液体检测装置包括通光孔、半透半反镜片和样品通道探测器；通光孔、半透半反镜片和样品通道探测器设于同一直线上，形成样品测试光路。

进一步，本发明提供一种血清中尿素氮肌酐含量近红外光谱测定方法，还可以具有这样的特征：其中，液体检测装置还包括空气通道探测器；空气通道探测器设于半透半反镜片的一侧，与样品测试光路垂直的方向，用于接收半透半反镜片的反射光。

进一步，本发明提供一种血清中尿素氮肌酐含量近红外光谱测定方法，还可以具有这样的特征：其中，液体检测装置还包括样品试管；样品试管放置在半透半反镜片和样品通道探测器之间，位于样品测试光路上；进行近红外光谱采集时，血清标定液或待检测的血清样品均放入样品试管中。

检测时，近红外光线通过通光孔，射至半透半反镜片上，一部分近红外光线由半透半反镜片反射进入空气通道探测器；另一部分近红外光线透过半透半反镜片照射样品试管，透过样品试管及其内部的测试液体(血清标定液或血清样品)射入样品通道探测器，光线在透过测试液体时发生吸收现象。