[发明专利]一种猪圆环病毒繁殖培养基及其应用有效
| 申请号: | 201710283815.9 | 申请日: | 2017-04-26 |
| 公开(公告)号: | CN107164334B | 公开(公告)日: | 2020-06-09 |
| 发明(设计)人: | 陈瑞爱;徐家华;刘郁夫;张舒琼;吴达兴;廖世昌 | 申请(专利权)人: | 肇庆大华农生物药品有限公司;华南农业大学 |
| 主分类号: | C12N7/00 | 分类号: | C12N7/00;C12N7/02 |
| 代理公司: | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人: | 谢嘉舜 |
| 地址: | 526238 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 种猪 圆环 病毒 繁殖 培养基 及其 应用 | ||
1.一种猪圆环病毒繁殖培养基,其特征在于,包括按体积百分比计的以下成分:
所述肽类物质溶液为明胶酶解物溶液,肽类物质的分子量为30-100K,肽在溶液中的浓度为20-30mg/mL;
所述明胶酶解物溶液通过以下方法制备获得:使用0.25%EDTA-胰酶溶液在温度为37℃的条件下酶解明胶,酶解时间为24~95h;然后用超滤膜进行过滤,得到明胶酶解物溶液;
酶解明胶时,明胶与EDTA-胰酶溶液的质量体积比为1:10。
2.一种如权利要求1所述的猪圆环病毒繁殖培养基的应用,其特征在于,将培养基应用于猪圆环病毒的培养中。
3.一种如权利要求1所述的猪圆环病毒繁殖培养基的应用,其特征在于,所述猪圆环病毒的培养包括以下步骤:
1)将PK-15细胞经传代和培养,PK-15细胞达到病毒接种的细胞密度时,将病毒接种至PK-15细胞中,并用猪圆环病毒繁殖培养基替换传代和培养PK-15细胞的培养基;
2)病毒繁殖结束后,离心去除细胞碎片;
3)采用超滤的方式去除小分子蛋白质,收集被截流的浓缩液;
4)使用分子筛层析方法分离猪圆环病毒,收集第一个蛋白质峰,得到猪圆环病毒。
4.如权利要求3所述的猪圆环病毒繁殖培养基的应用,其特征在于,步骤2)中,离心的速度为3000-8000rmp/min,离心时间为10-50min。
5.如权利要求3所述的猪圆环病毒繁殖培养基的应用,其特征在于,步骤3)中,超滤的方式中超滤膜的孔径为10-500K。
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