[发明专利]三疣梭子蟹病原需钠弧菌双重PCR快速检测试剂盒与方法有效

专利信息
申请号: 201710281965.6 申请日: 2017-04-26
公开(公告)号: CN106939347B 公开(公告)日: 2020-08-04
发明(设计)人: 毕可然 申请(专利权)人: 淮海工学院
主分类号: C12Q1/689 分类号: C12Q1/689;C12N15/11;C12Q1/04;C12R1/63
代理公司: 连云港润知专利代理事务所 32255 代理人: 刘喜莲
地址: 222000 江苏省连云港市海*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 梭子蟹 病原 弧菌 双重 pcr 快速 检测 试剂盒 方法
【权利要求书】:

1.一种三疣梭子蟹病原需钠弧菌双重PCR快速检测试剂盒,其特征在于,该试剂盒由下列物品组成:

1)阴性对照,成份为1mL灭菌双蒸水1支;

2)阳性对照,试剂成份为溶于1mL灭菌双蒸水中100ng的需钠弧菌(Vibrionatriegens)XA1菌株DNA 1支;

3)含Mg2+、dNTP和DNA聚合酶的PCR缓冲液 1支;

4)引物对toxR-F/toxR-R

toxR-F为:5'-AAT CCG CTT TCC TCT GTT-3' 1支;

toxR-R为:5'-GGC GTT AGC ACA GGT ACA-3' 1支;

5)引物对Vhh-F/Vhh-R

Vhh-F:5'-AAT GTC ATC CGC CAA CGA-3' 1支;

Vhh-R:5'-CCG TCA GGC GAA TCA ATG-3' 1支;

6)灭菌双蒸水 1支;

7)包装盒子,一块泡沫板,其大小与包装盒子的底面相同,装于盒子中;泡沫板上有不少于小管数量的小孔,各小管分别对应放置于这些小孔中;将阳性对照单独存放;试剂盒于-20℃保存。

2.根据权利要求1所述的一种三疣梭子蟹病原需钠弧菌双重PCR快速检测试剂盒,其特征在于,引物设计的设计方法如下:参照GenBank上收录需钠弧菌的溶血素vhh基因序列DQ663483和跨膜转录激活蛋白toxR基因序列JF930637设计两对引物。

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