[发明专利]一种基于脂肪酸组成差异性鉴别岱衢族与闽-粤东族大黄鱼的方法

权利要求书

1.一种基于脂肪酸组成差异性鉴别岱衢族与闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于：具体步骤如下：1)材料制备：采集大黄鱼肌肉；

2)对大黄鱼肌肉进行总脂的抽提，皂化，甲酯化；

3)气相色谱质谱联用分析：对脂肪酸甲酯化样品进行气相色谱质谱联用分析，获得气相色谱保留时间和质谱图；

4)定性与定量分析脂肪酸：根据气相色谱保留时间和质谱图与标准谱库对比，分析获取各种脂肪酸的种类，采用面积归一法计算出各脂肪酸组分的百分含量；

5)鉴别分析：当所述肌肉中脂肪酸[C18：1/(C20：1+C22：1)]＜5.0时，判别所采集的大黄鱼为岱衢族大黄鱼；当所述肌肉中脂肪酸[C18：1/(C20：1+C22：1)]＞5.0时，判别所采集的大黄鱼为闽-粤东族大黄鱼。

2.根据权利要求1所述的一种基于脂肪酸组成差异性鉴别岱衢族与闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于：当所述肌肉中脂肪酸C20：5/C20：4＞4.0时，判别所采集的大黄鱼为岱衢族大黄鱼；当所述肌肉中脂肪酸C20：5/C20：4＜4.0时，判别所采集的大黄鱼为闽-粤东族大黄鱼。

3.根据权利要求1所述的一种基于脂肪酸组成差异性鉴别岱衢族与闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于：所述肌肉采集自大黄鱼背部侧线位置。

4.根据权利要求3所述的一种基于脂肪酸组成差异性鉴别岱衢族与闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于：其中，步骤2)中取背部侧线位置肌肉冷冻干燥后，准确称取0.1g干重肌肉提取总脂。

5.根据权利要求1所述的一种基于脂肪酸组成差异性鉴别岱衢族与闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于：其中，步骤3)中的气相色谱条件为：进样口温度250℃，载气为纯度为99.999％的高纯氦，柱流速0.81ml/min，柱前压73.0KPa，柱起始温度150℃，保持3.5min后，以20℃/min升至200℃，再以5℃/min升至280℃，保持37min；分流进样1μL，分流比50∶1；

质谱条件为：离子源选用电子轰击源，电子能量为70eV，离子源温度200℃，接口温度250℃，选取全程离子碎片扫描模式，质量扫描范围为40～600，溶剂延迟3.5min；用化学电离源分析时，反应气为甲烷。

6.根据权利要求1所述的一种基于脂肪酸组成差异性鉴别岱衢族与闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于：其中，步骤2)中总脂的皂化方法为：在总脂中加入2mL5％-6％的氢氧化钾-甲醇水4∶1(V/V)溶液，60℃温度下水浴2h，冷却后移到离心管中，加入1ml的饱和NaCl溶液，再用1∶1(V/V)盐酸调节pH至小于1后，1∶4氯仿∶正己烷(V/V)6ml分三次混合均匀后提取，提取液合并后加2ml蒸馏水取上层液后，旋转干燥；

甲脂化方法为：向皂化后的样品中，加入0.5mL14％BF₃-甲醇液，60℃的水浴锅中加热1h，取出冷却后转移到离心管中，用4ml正己烷分两次加入样品瓶浸润后分别加入试管中提取，再加入3ml的1∶4氯仿∶正己烷(V/V)提取，合并提取液后，加入3g无水Na₂SO₄静置5-6小时，取上层液蒸干，用1mL色谱纯正己烷定容后，上机分析。