[发明专利]一种从厌氧氨氧化污泥中提取和测定亚铁血红素的方法

权利要求书

1.一种从厌氧氨氧化污泥中提取和测定亚铁血红素的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.原位获取生物污泥样品，将其在0～4℃，3000～5000g离心力条件下作用10～30min，去除上清液得到无杂质污泥；S2.将S1所得无杂质污泥置于磷酸盐缓冲溶液中震荡均匀，在0～4℃，3000～5000g离心力条件下作用10～30min后弃去上清液，重复操作，直至得到的上清液为无色，弃去上清液得到菌体；S3.取S2所得菌体置于磷酸盐缓冲溶液中，在800～900w功率下进行细胞超声破碎，然后在0～4℃，10000～17000g离心力条件下作用10～30min后过滤，得到的悬浮液体即为亚铁血红素溶液；S4.测定亚铁血红素溶液荧光强度；步骤S4所述测定亚铁血红素溶液荧光强度包括如下步骤：S41.取步骤S3得到的亚铁血红素溶液与饱和草酸溶液混合，体积比为1:10～1:12，震荡均匀；S42.将S41获得的混合溶液在100～110℃下加热20～30min，冷却备用；S43.使用不含有亚铁血红素的样品作为空白，采用三维荧光光谱仪测定激发波长为240～500nm及发射波长为500～700nm处的荧光强度。

2.根据权利要求1所述从厌氧氨氧化污泥中提取和测定亚铁血红素的方法，其特征在于，步骤S2所述磷酸盐缓冲溶液浓度为10mM，pH为7.5。

3.根据权利要求1所述从厌氧氨氧化污泥中提取和测定亚铁血红素的方法，其特征在于，步骤S3所述细胞超声破碎时，工作/间歇时间为5s/6s。

4.根据权利要求1所述从厌氧氨氧化污泥中提取和测定亚铁血红素的方法，其特征在于，步骤S41所述饱和草酸溶液浓度为2 M。

5.权利要求1～3中任一项所述从厌氧氨氧化污泥中提取和测定亚铁血红素的方法得到的厌氧氨氧化污泥亚铁血红素。