[发明专利]一种测定BACE1酶切NRG1活性的检测方法及其试剂盒

权利要求书

1.BACE1酶切多肽底物在制备精神分裂症诊断试剂或试剂盒中的应用，所述BACE1酶切多肽底物的结构式为：R₁-GI-EFME-AEK-R₄，当R₁为荧光发射基团时，R₄为荧光猝灭基团或荧光发射基团；或者，当R₁为荧光猝灭基团时，R₄为荧光发射基团；E为谷氨酸，F为苯丙氨酸，M为甲硫氨酸，G为甘氨酸，I为异亮氨酸，A为丙氨酸，K为赖氨酸。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述荧光发射基团为：罗丹明类化合物、荧光素类化合物、BODIPY类化合物、EDANS类化合物、香豆素类化合物、对甲氨基酚类化合物、花菁类化合物、吖啶类化合物、异吲哚类化合物、丹酰类化合物、氨基邻苯二甲酸酰肼类化合物、邻氨基苯甲酸类化合物、氨基邻苯二甲酰亚胺类化合物、氨基萘二甲酰亚胺类化合物、氨基苯并呋喃类化合物、氨基喹啉类化合物或二氰基氢醌类化合物；

所述荧光猝灭基团为：硝基苯基、硝基苄氧基羰基、硝基苯甲酰基等硝基化芳香族化合物、靛兰类化合物、苯并醌类化合物、蒽醌类化合物、偶氮化合物、茚苯胺类化合物、或者二或三苯基甲烷类化合物。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述荧光发射基团为鲁米诺、异鲁米诺、罗丹明110、罗丹明6G、罗丹明123、罗丹明B、羧基四甲基罗丹明、荧光素、异硫氰酸荧光素、5-羧基荧光素、6-羧基荧光素、四氯荧光素、六氯荧光素、羧基-4',5'-二氯-2',7'-二甲氧基荧光素、或邻氨基苯甲酸。

4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述荧光猝灭基团为：2,4-二硝基苯酚、硝基苯基、硝基苄氧基羰基、或者硝基苯甲酰基。

5.如权利要求1所述的应用，所述的BACE1酶切多肽底物为(Abz)-GIEFMEAEK-(Dnp)-NH₂、(Abz)-GIEFMEAEK-(Dnp)-COOH、(Dnp)-GIEFMEAEK-(Abz)-NH₂、或(Dnp)-GIEFMEAEK-(Abz)-COOH。

6.如权利要求1-5任一项所述的应用，所述精神分裂症是发病早期的精神分裂症，或者重症精神分裂症。

7.如权利要求1-5任一项所述的应用，所述精神分裂症的诊断是针对患有精神分裂症或具有发生精神分裂症可能性的人展开的；所述具有发生精神分裂症可能性的人是指其存在精神分裂症家族遗传性的人。

8.如权利要求1-5任一项所述的应用，所述诊断试剂或诊断试剂盒中进一步包含缓冲液。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述缓冲液的pH为2.9-4.6。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述缓冲液的pH为2.9-4.0。

11.如权利要求10所述的应用，其特征在于，所述缓冲液的pH为2.9-3.5。

12.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述缓冲液为醋酸-醋酸盐缓冲液，磷酸-磷酸盐缓冲液，柠檬酸-柠檬酸盐缓冲液，甘氨酸-盐酸缓冲液，磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液，或者醋酸-氯化钠缓冲液。

13.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述缓冲液为醋酸-氯化钠缓冲液，含有50mM醋酸和100mM氯化钠。

14.如权利要求1-5任一项所述的应用，所述诊断试剂或诊断试剂盒中进一步含有样品裂解液，所述裂解液含有：Tris-HCl、NaCl、EDTA或其盐、EGTA或其盐、Na₃VO₄、甘油和TritonX-100。