[发明专利]一种酪氨酸衍生物的提取纯化方法有效
申请号: | 201710272120.0 | 申请日: | 2017-04-24 |
公开(公告)号: | CN106883286B | 公开(公告)日: | 2023-07-21 |
发明(设计)人: | 张玉峰;何连顺;米造吉;李斌水;马静 | 申请(专利权)人: | 精晶药业股份有限公司 |
主分类号: | C07K5/062 | 分类号: | C07K5/062;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/24 |
代理公司: | 石家庄国为知识产权事务所 13120 | 代理人: | 王丽巧 |
地址: | 055550*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 酪氨酸 衍生物 提取 纯化 方法 | ||
本发明涉及酪氨酸衍生物制备技术领域,具体公开了一种酪氨酸衍生物的提取纯化方法,包括如下步骤:将微生物酶转化法生产酪氨酸衍生物所得转化液依次通过陶瓷膜分离可见杂质、活性炭脱色、电渗析除盐、高分子超滤膜分离高分子蛋白杂质、减压浓缩、活性炭脱色、结晶得酪氨酸衍生物粗粉。本发明方法能够快速处理转化液获得酪氨酸衍生物粗品,成本低,操作简便,产品质量好,减少产品中杂质含量,提高产品质量和收率,具有良好的经济效益。
技术领域
本发明涉及酪氨酸衍生物制备技术领域。
背景技术
酪氨酸是维持细胞生长必备的氨基酸之一,丙氨酰酪氨酸及甘氨酰酪氨酸作为一种新型的培养基成分,是非常重要的酪氨酸二肽衍生物,在医药、化工、生物发酵领域应用广泛,在国外市场上也有很大的应用。酪氨酸衍生物主要通过微生物酶转化法制备,具有生产时间短、工艺控制简单、生产过程无污染、低成本的优点,但是由于制得的转化液中除产物外还包含一定量的反应底物、酶等,使得转化液分离提取产物困难,分离所得产品杂质含量高、种类多,质量差。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种酪氨酸衍生物的提取纯化方法,能够快速处理转化液获得酪氨酸衍生物粗品,成本低,操作简便,产品质量好,减少产品中杂质含量,提高产品质量和收率,具有良好的经济效益。
为解决上述技术问题,本发明所采取的技术方案是:一种酪氨酸衍生物的提取纯化方法,包括如下步骤:
(1)将微生物酶转化法生产酪氨酸衍生物所得转化液通过陶瓷膜分离可见杂质,得到陶滤清液;
(2)向陶滤清液中加入活性炭,加热搅拌脱色,过滤,得到脱色后料液;
(3)将脱色后料液用电渗析除盐,得到除盐后料液;
(4)将除盐后料液用高分子超滤膜分离高分子蛋白杂质,得到超滤清液;
(5)将超滤清液减压浓缩除水,得浓缩液;
(6)将浓缩液加入活性炭,加热搅拌脱色,过滤,得到脱色后结晶液;
(7)将结晶液冷却,加入有机亲水性溶剂,降温、结晶,再经过过滤、洗涤、干燥,得酪氨酸衍生物粗粉。
优选的,所述步骤(1)中,陶瓷膜孔径为50μm。
优选的,所述步骤(2)中,活性炭的加入量与所述陶滤清液的质量体积比为1.5~4:1000kg/L,并控制50~70℃加热搅拌脱色。
优选的,所述步骤(3)中,电渗析操作时,控制电压<220伏,控制脱色后料液pH值为4~9,除去盐分,监控溶液的电导率,终点控制电导率<2ms,即得到除盐后料液。
优选的,所述步骤(4)中,高分子超滤膜的截留分子量为10000。
优选的,所述步骤(5)中,将超滤清液加热至50~70℃,减压浓缩出超滤清液总体积20~60%的水量,得浓缩液。
优选的,所述步骤(6)中,活性炭的加入量与所述浓缩液的质量体积比为1.5~4:1000 kg/L,并控制50~70℃加热搅拌脱色。
优选的,所述步骤(7)中,将结晶液冷却到20~30℃,加入结晶液体积3~5倍的有机亲水性溶剂。
优选的,所述步骤(7)中,有机亲水性溶剂为甲醇。
本发明方法优选用于酪氨酸二肽衍生物或酪氨酸三肽衍生物的提取纯化。
采用上述技术方案所产生的有益效果在于:本发明方法能够快速处理转化液,提取获得酪氨酸衍生物粗品,产品结晶前为水相,环保安全,成本低,操作简便,所得产品质量稳定,能够有效减少产品中杂质含量,提高产品质量和收率,具有良好的经济效益。
具体实施方式
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