[发明专利]双菌半干法发酵脱脂米糠获得活性物的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及双菌半干法发酵脱脂米糠获得活性物的方法。

背景技术

米糠占整粒稻谷的8%，但却集中了稻米中64%的营养素和90%的人体必需元素，以及多种的功能活性物质，如维生素、γ-谷维素、角鲨烯、甾醇以及谷物多酚等，是稻米功效成分最密集的部位。米糠经过脱脂后，除部分脂溶性维生素等功能成分随米糠油被提走外，大部分水溶性多糖、氨基酸及膳食纤维等活性因子仍保留在糠粕内。米糠蛋白中的主要成分是清蛋白、球蛋白、谷蛋白以及醇溶蛋白，这4种蛋白的比例大概 为37：36：22：5。可溶性蛋白约70%，米糠蛋白具有低过敏性，极易吸收，营养价值较为理想。所具有的氨基酸组成接近FAO/WHO推荐模式，是作为婴幼儿断乳食品的理想原料。米糠多糖广泛存在于稻谷颖果皮层中，主要是由以a -1，6糖苷键为主要结构的多糖组成。 其中，水溶性多糖与一般聚糖不同，是一种结构复杂的杂聚糖，由木聚糖、甘露糖、鼠李糖、 半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖等组成。它们都具有显著的生物活性和保健功能，如抗肿瘤、免疫增强和降血糖等。

采用物理化学等方法提取的功能成分比较单一，微生物发酵在提升农产品及其加工副产物附加值中有着广泛的应用。随着发酵工艺的发展，微生物发酵的生产方式已从单一菌种发酵向多菌种协同发酵方向发展，并注重不同微生物之间的协同性和互补性，使其发挥正组合效应。由于多菌种发酵有利于各菌种协同作用于半干法基质上，往往比单独菌种作用效果更明显，使之成为当前研究的热点。酵母菌富含氨基酸、核酸、维生素等多种生理活性物质，其代谢能产生多种酶类，并易于与其他菌种协同发酵。枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶等酶类。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明的目的在于设计提供一种双菌半干法发酵脱脂米糠获得活性物的方法的技术方案。

本发明是在多种复合菌配合下的大量筛选实验后，首次公开优选利用酵母菌和枯草芽孢杆菌双菌半干法发酵脱脂米糠，发酵后用于活性成分米糠蛋白与米糠多糖的提取，脱脂米糠经过双菌半干法发酵处理后，提高米糠蛋白与米糠水溶性多糖的产量，对其组成有改变。以往的微生物发酵，大多是2-3种菌对混合底料进行发酵，并且直接用为饲料，对利用酵母菌和枯草芽孢杆菌双菌半干法发酵脱脂米糠没见报道，由于单独基质如脱脂米糠的蛋白与多糖与其他的天然基质组成就不同，再用经过筛选的不同组合的菌发酵，获得蛋白与多糖的组成也不同，特别是我们还将他们分离出来，有利于食品、营养品和医药等的精致应用。步骤如下：

所述的双菌半干法发酵脱脂米糠获得活性物的方法，其特征在于包括以下工艺步骤：

1）取粉碎后的脱脂米糠加入水，使其含水量达到30%-50%，再将该脱脂米糠灭菌后进行发酵，发酵方式以0.2-2%的接种量按酵母菌和枯草芽孢杆菌质量比=1:1双菌接菌，28-40℃发酵3-6d；

2）取步骤1）得到的发酵后脱脂米糠与水按重量比1:10混合，调pH=11，超声提取10分钟，过滤，得到滤液1和滤渣1；滤液1调pH=4.5，过滤，得到滤渣2和滤液2，滤渣2冷冻干燥即为米糠蛋白质，滤渣1和滤液2备用；

3）将步骤2）得到的滤渣1，按液料的重量比1：10加水，pH值中性条件下超声萃取20分钟，过滤，得到滤液3和滤渣3，滤液2与滤液3合并浓缩至一半，用60%乙醇沉淀，获米糠多糖；

4）步骤3）得到的滤渣3经水洗涤、烘干，得到膳食纤维；

5）对双菌半干法发酵脱脂米糠获得活性物的进行分析。

所述的双菌半干法发酵脱脂米糠获得活性物的方法，其特征在于所述步骤1）中含水量为35-45%。

所述的双菌半干法发酵脱脂米糠获得活性物的方法，其特征在于所述步骤1）中接种量为0.5-1.5%。

所述的双菌半干法发酵脱脂米糠获得活性物的方法，其特征在于所述步骤1）中发酵温度30-35℃，发酵时间4-6d。

所述的双菌半干法发酵脱脂米糠获得活性物的方法，其特征在于所述步骤1）中酵母菌为啤酒酵母菌，菌总数180亿/克，枯草芽孢杆菌菌总数200亿/克。

所述的双菌半干法发酵脱脂米糠获得活性物的方法，其特征在于所述步骤2）中超声提取条件为超声功率50W、频率80KHZ。

所述的双菌半干法发酵脱脂米糠获得活性物的方法，其特征在于所述步骤3）中超声萃取条件条件为超声功率50W、频率80KHZ。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：