[发明专利]人血清淀粉样蛋白A1功能性短肽及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种人血清淀粉样蛋白A1功能性短肽及其制备方法和应用。具体地，本发明提供一种人血清淀粉样蛋白A1多肽片段或其药学上可接受的盐，所述的多肽片段具有以下特征：(i)该多肽片段的序列来源于人血清淀粉样蛋白A1的氨基酸序列；和(ii)该多肽片段为人血清淀粉样蛋白A1(SAA1)全长氨基酸序列(104氨基酸)的第M位到第N位，且长度为42‑67个氨基酸，其中M为9‑14的任一正整数，N为55‑75的任一正整数。本发明的人血清淀粉样蛋白功能性短肽具有抑制致炎细胞因子表达、促进抗炎细胞因子表达的能力，可用于制备治疗炎症疾病的药物。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种人血清淀粉样蛋白A1功能性片段及其制备方法和应用。

背景技术

血清淀粉样蛋白A(Serum Amyloid A,SAA)是机体受到感染和损伤时分泌的一种主要的急性期蛋白。SAA是一个多态性蛋白的总称，由相关但各具独立基因的蛋白(SAA1-SAA4)组成。其中，人血清淀粉样蛋白A1(SAA1)由104个氨基酸组成，主要由肝细胞合成，人SAA2与SAA1有7个氨基酸的差别，它们均为急性时相蛋白。SAA3是一个假基因，SAA4在急性时相反应中变化不大，在机体中持续少量产生。

研究表明，SAA在急性和慢性炎症患者血清内含量均有大量上升，因此是一个反映感染性和非感染性炎症疾病的重要生物检测指标。SAA不仅是慢性阻塞性肺病急性加重期的生物标志物，也是急性心梗患者在接受急诊冠状动脉介入手术后发生心脏破裂的预期因子，这为早期发现心脏破裂患者提供了重要参考指标。其他大量研究也表明，在胰腺炎、肝炎、冠心病、糖尿病、慢性肾脏疾病、类风湿性关节炎、炎性肠炎、急性和慢性肺炎及肥胖病例中，SAA升高与疾病活动和病程发展有非常密切的关系。目前临床研究还认为，所有急性期反应蛋白中，SAA对急性炎症反应最敏感，升值幅度最大。同时研究还表明SAA与甲胎蛋白等肿瘤相关蛋白相似，其在血清中的浓度与癌症发生呈正相关。因此，在临床上对SAA在病人血清中含量的检测具有辅助诊断价值。

同时，SAA不仅是一种简单的炎症标志物，还积极介入疾病的相关过程。在急性感染或者炎症发生时，血清内SAA的水平可提升1000倍。高水平的SAA将导致淀粉样病变，而且低密度脂蛋白与SAA的结合物(LDL-SAA)可提高心血管疾病的风险；同时，SAA还具有促炎反应的特性，促进多种细胞因子的分泌，如IL-1β，IL-6，MMPs，CCL20等，这些细胞因子都参与炎症导致的疾病的发病过程，如，风湿性关节炎，肌肉萎缩，痛风，动脉粥样硬化等。由于SAA与多种疾病的发生相关，针对SAA的治疗方法已越来越受到重视。

目前，已知SAA与六种受体结合，Toll-like receptor(TLR)包括TLR2和TLR4，SRB1(a class B scavenger receptor)，及其G蛋白偶联受体formyl peptide receptor 2(FPR2)，receptor for advanced glycation endproduct(RAGE)，P2X7receptor)。SAA与不同的受体结合所发挥的生物学活性不一样，例如，SAA与FPR2结合可诱导滑液超常增生及其内皮细胞的增殖，从而导致类风湿性关节炎的发生；SAA与CD36结合可促进胆固醇的代谢；SAA与SRB1结合可产生炎症诱发因子，导致动脉粥样硬化等疾病；SAA与TLR4结合可诱导NO的产生。由此可见，SAA1在机体中发挥多种生物学活性。

为了更明确地对SAA1进行结构及其生物学活性的研究与分析，本专利设计了酵母表达系统，表达没有脂多糖干扰的重组人SAA1及其结构类似的多肽。这种以酵母为宿主的表达方式不仅摆脱了多年来SAA1研究中所碰到的脂多糖困扰的问题，实现体内外研究不受脂多糖干扰的SAA1的生物学作用，还可利用酵母表达系统表达多种SAA1结构类似的多肽进行功能研究，从而发现SAA发挥活性的结构域和功能域。同时还可利用详尽的人SAA1不同肽段所发挥的生物学活性的研究结果，设计相应的阻断剂，为临床治疗提供潜在的候选药物。

然而，本领域尚缺乏令人满意的能够有效抑制致炎细胞因子，从而可有效治疗炎症或炎症相关疾病的药物。