[发明专利]一种褐藻铁钉菜多糖提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及多糖提取领域，具体涉及一种褐藻铁钉菜多糖提取方法。

背景技术

海藻多糖是一种天然活性物质，它具有调节机体免疫功能的作用，如可以通过促进淋巴细胞增殖与分化、刺激巨噬细胞的吞噬功能、促进细胞因子和抗体的产生等途径来实现对机体免疫系统功能的调节。

目前，全球使用最广泛的海藻提取功能食品配料就是从海带、巨藻等褐藻中提取的海藻酸盐等天然海藻多糖产品。但从铁钉菜中提取多糖研究的很少，铁钉菜(Ishige okamurai Yendo)为藻类褐藻门铁钉菜科铁钉菜属植物，广泛分布于我国东海、南海礁岩石上，民间用于喉咙炎、淋巴结炎、甲状腺肿的治疗，具有清热解毒，软坚散结的作用。国内对铁钉菜的研究较少，汤海峰等从浙江产的铁钉菜中分离出39个化合物；杨尚军等报导分离出岩藻甾醇、甘露醇、十六烷酸；郑怡等从福建产的铁钉菜中提取凝集素对枯草杆菌、啤酒酵母细胞有较好凝集作用；龚丽芬等以超声波协同热水提取水溶性多糖,考察了液固比、超声波强度、提取时间、提取温度和pH对铁钉菜多糖提取率的影响,其最高提取率为1.03％，考虑到褐藻铁钉菜为我国沿海优势种，为了充分了利用自然资源，有必要对铁钉菜进行相关活性成分的研究，对于现有技术铁钉菜多糖提取方法，提取率较低，需要加大相关研究，以提高多糖的提取率。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明提供了一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，该方法操作简单，使用安全，提取效率高，可用于大规模生产。

一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，包括以下步骤：

1)采集烘干：采集铁钉菜流水清洗，用超声波清洗器低频率清洗，放入恒温培养箱烘干；

2)粉碎：用粉碎机将铁钉菜样品进行粉碎，用筛网过滤后即得到铁钉菜干粉；

3)预处理：取步骤2)中的铁钉菜干粉于容器中，加入95％的乙醇，浸泡，用双层纱布过滤，重复3次，将过滤后的铁钉菜风干即得预处理铁钉菜干粉；

4)混合提取：在预处理的铁钉菜干粉中加入蒸馏水，于高压灭菌锅中115℃条件下提取0.5h，然后放入超声波发生器中将频率调到130KHZ，温度75℃，超声萃取30min；

5)离心：离心，收集上清夜；

6)浓缩沉淀：真空旋转蒸发仪浓缩至有固体开始析出，得浓缩液，向浓缩液中加入95％乙醇，静置，离心，最后加入75％的乙醇反复洗涤，得到的沉淀烘干即得到铁钉菜多糖。

作为优选，所述步骤1)超声波低频率为25KHZ；超声波清洗器清洗的时间为8～12min，更优选为10min。

作为优选，所述步骤1)中的烘干程序为先用120℃烘干15min，然后调至80℃，烘干8小时至恒重。

作为优选，所述步骤2)中筛网的目数为80～100目。

作为优选，所述步骤3)的铁钉菜干粉与95％的乙醇重量比为1:5，所述浸泡时间为11～13h。

作为优选，所述步骤4)中的预处理铁钉菜干粉与蒸馏水的重量比为1:5～1:6。

作为优选，所述步骤5)及步骤6)中的离心转速为4000r/min，离心时间为10min。

作为优选，所述步骤6)中95％的乙醇体积是浓缩液的3～5倍。

作为优选，所述步骤6)中静置时间为8～10小时。

作为一种优选的技术方案，一种褐藻铁钉菜多糖提取方法，包括以下步骤：

1)采集烘干：采集铁钉菜流水清洗，用超声波清洗器低频率清洗10min，放入恒温培养箱中120℃，15min；调至80℃，烘干8小时至恒重。

2)粉碎：用粉碎机将铁钉菜样品进行粉碎，过80目筛网过滤后即得到铁钉菜干粉。

3)预处理：取步骤2)中的铁钉菜干粉于容器中，加入95％的乙醇，铁钉菜干粉与95％的乙醇重量比为1:5，浸泡12h，用双层纱布过滤，重复3次，将过滤后的铁钉菜风干即得预处理铁钉菜干粉；

4)混合提取：在预处理铁钉菜干粉中加入蒸馏水，预处理藻粉与蒸馏水的重量比为1:5，于高压灭菌锅中115℃条件下提取0.5h，然后放入超声波发生器中将频率调到130KHZ，温度75℃，超声萃取30min；

5)离心：离心转速为4000r/min，离心时间为10min，收集上清夜；

6)浓缩沉淀：真空旋转蒸发仪浓缩至有固体开始析出，得浓缩液，向浓缩液中加入3倍体积的95％乙醇，静置8小时，离心，离心转速为4000r/min，离心时间为10min，最后加入75％的乙醇反复洗涤，得到的沉淀烘干即得到铁钉菜多糖。