[发明专利]一种Cu

权利要求书

1.一种Cu⁺荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)Cu⁺配体的制备

(1-1)在氢溴酸中，式(1)羟乙基硫醚与硫脲进行过夜回流，即第一反应；然后加入氢氧化钠进行过夜回流，即第二反应，得到油状物式(2)2-乙硫基硫醇；所述反应过程如下反应式(a)所示：

(1-2)在有机溶剂中，钠和式(2)2-乙硫基硫醇进行过夜回流，即第三反应；冷却至室温后，和双(2-氯乙基)胺盐酸盐回流反应，即第四反应，最终纯化后得到式(3)Cu⁺配体；所述反应过程如下反应式(b)所示：

(2)石墨相氮化碳量子点GCNQD的制备

(2-1)式(4)三聚氰胺煅烧：氮气气氛下分段煅烧，得到块状石墨相氮化碳；式(4)三聚氰胺在煅烧过程中形成式(5)七嗪环，继续升温后得到式(6)块状石墨相氮化碳；所述反应过程如下反应式(c)所示；

(2-2)超声：将块状石墨相氮化碳在有机溶剂中超声，得到片状石墨相氮化碳；

(2-3)将片状石墨相氮化碳在高温下反应12h，然后溶于水，进行超声得到所述石墨相氮化碳量子点GCNQD；

(3)Cu⁺荧光探针的制备

(3-1)步骤(2)制备的石墨相氮化碳量子点GCNQD和支化聚乙烯亚胺PEI进行反应，得到PEI包裹的石墨相氮化碳量子点；

(3-2)在有机溶剂中，PEI包裹的石墨相氮化碳量子点、乙醛酸、步骤(1)所制备的式(3)Cu⁺配体进行反应，得到所述Cu⁺荧光探针。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1-1)中，所述第一反应的温度为100℃-120℃；所述第二反应的温度为100℃-120℃；所述羟乙基硫醚、硫脲、氢溴酸、氢氧化钠的摩尔比为(4-5)：(4-5)：(7-8)：(8-10)；

步骤(1-2)中，所述第三反应的温度为100℃-120℃；所述第四反应的温度为100℃-120℃；所述钠、式(2)2-乙硫基硫醇、双(2-氯乙基)胺盐酸盐的摩尔比为(23-24)：(2-3)：(4-5)。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2-1)中，所述煅烧的温度为350℃-600℃；

步骤(2-2)中，所述超声的时间为12h-24h；

步骤(2-3)中，所述高温为140℃；所述高温的操作时间为10h-12h；所述超声的时间为0.5h-1h；

步骤(3-1)中，所述反应的温度为室温；所述石墨相氮化碳量子点GCNQD、支化聚乙烯亚胺PEI的摩尔比为20-25：0.9-1.2；

步骤(3-2)中，所述反应的温度为36℃-40℃；所述PEI包裹的石墨相氮化碳量子点GCNQD、乙醛酸、Cu⁺配体的摩尔比为1：1：1。

4.一种如权利要求1～3之任一项所述的方法制备得到的Cu+荧光探针。

5.将如权利要求4所述的Cu⁺荧光探针用于在体外和/或细胞内检测Cu⁺中的应用；其中，所述细胞不包括来源于人的细胞。

6.如权利要求4所述的Cu⁺荧光探针在细胞成像与生物传感中的应用。

7.一种体外Cu⁺的荧光检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：在缓冲液中，将权利要求4所述的Cu⁺荧光探针与Cu⁺混合摇匀进行反应，在激发波长405nm下测定探针荧光强度，从而实现对Cu⁺的定量检测。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液；所述反应的温度为室温；所述反应的时间为30s-5min。