[发明专利]一种同时测定野菊花中七种成分的含量的方法

权利要求书

1.一种同时测定野菊花中七种成分的含量的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：

1)对照品溶液的制备

分别精密称取绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、蒙花苷、木犀草素、芹菜素对照品适量，加甲醇溶解并定容，制成质量浓度分别为0.8469mg.mL^-1、0.5670mg.mL^-1、0.3967mg.mL^-1、0.6738mg.mL^-1、0.1962mg.mL^-1、0.6244mg.mL^-1、1.049mg.mL^-1的对照储备液，再分别精密吸取7个对照品储备液0.6、0.9、1.3、0.8、2.5、0.8、0.5mL，置同一25mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得混合对照品溶液A，精密吸取对照品溶液A1mL至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，制得混合对照品溶液B，避光保存；

2)快速溶剂萃取法制备供试品溶液

取本品粉末0.25g，与1g硅藻土混合均匀填充于5mL萃取池，按快速溶剂萃取仪优化的条件进行提取，萃取溶剂为甲醇、萃取温度100℃、静态萃取时间7min、冲洗体积60％、循环萃取2次，萃取结束后，将萃取液浓缩至5mL后，转移至10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

3)将对照品溶液和试品溶液分别注入色谱仪检测，色谱柱为Syncronis C18，流动相为乙腈-0.5％磷酸水溶液进行梯度洗脱；流速0.5mL.min^-1，检测波长334nm，柱温35℃，进样量2μL；

4)取混合对照品溶液，分别进样0.2、0.5、1、2、3、4、5μL，在上述色谱条件下测定其峰面积，以各成分进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程及相关系数。

2.根据权利要求1所述的一种同时测定野菊花中七种成分的含量的方法，其特征在于，所述的梯度洗脱程序为0～4min，10％～20％乙腈，90％～80％磷酸水溶液；4～10min，20％～26％乙腈，80％～74％磷酸水溶液；10～18min，26％～30％乙腈，74％～70％磷酸水溶液；18～20min，30％～40％乙腈，70％～60％磷酸水溶液；20～20.5min，40％～80％乙腈，60％～20％磷酸水溶液；20.5～23min，80％乙腈，20％磷酸水溶液；23.1min，10％乙腈，90％磷酸水溶液。