[发明专利]疙瘩杨组培快繁技术

说明书

技术领域

本发明涉及一种树木的组织培养技术，具体为濒危疙瘩杨的组培繁殖技术。

背景技术

疙瘩杨，是银白杨的一个变异品种，因其树干和大的枝干有环状或不规则的凸起，形似疙瘩，故而得名。它的枝杈稀疏、冠形松散、枝干尖削度大、表皮粗糙。其木材纹理纵横交错，在纵切面上显现出自然而无序的各种奇特美丽的图案，是一种极为珍稀的特种工艺用材树种。它的用途广泛，其原木抗纵横向压力远高于箭杆杨、新疆杨等普通杨树树种，可做木碗、木盆和其他器具、木制家具，以及用做室内雕刻艺术品，同时还是优良的绿化观赏树种等。

新疆当地疙瘩杨濒临灭绝，抢救野生疙瘩杨的任务异常紧迫。疙瘩杨的种源稀少，扦插繁殖材料有限，传统林木繁殖方法无法解决其繁殖保护问题，需要快速繁殖。

胡受军等发表的文章“疙瘩杨组培快繁技术及苗期管理”（新疆林业，2010，5）提供了一种利用组织培养快速繁殖疙瘩杨的技术方法，能够实现疙瘩杨的组培繁殖，但由于其培养基及激素配比选择及培养控制条件与方法不尽理想，其诱导成苗率低，繁殖系数、生根系数不高，并且移栽成活率不高，影响了组织培养的效果。需要进一步改进开发。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可高效快速繁殖疙瘩杨的组培技术方法。

本发明提供的疙瘩杨组培快繁技术，包括外植体准备、诱导、增殖、生根、炼苗、移栽环节，其特征在于组织培养条件为PH值5.4-5.8，温度25℃-28℃，自然光照12h/d，各步骤如下：

（1）外植体准备。取当年生的无虫害、无病害的健壮的嫩枝条作为外植体，除去多余的叶片和叶柄，抹去枝条上的绒毛，用75%的酒精擦拭茎段和腋芽处，把处理好的茎杆剪成10cm左右，用膜或报纸包好放在温度为4℃的冰箱中冷藏12h，将冷藏过后的茎杆在洗洁精水中冲洗干净，在流动的自来水上冲洗1h， 将冲洗干净的枝条剪成1.5-2cm的茎段，每一个茎段带一个芽；用75%的酒精：0.1%的升汞为1:3的比例混合液对外枝体进行消毒6-8min，取出后用无菌水冲洗5-6次后备用。

（2）诱导。培养基为MS+6BA0.2mg/L+NAA0.01mg/L，蔗糖浓度30g/L，琼脂5g/L，将前述整备的茎段接种在本培养基上，培养30d，新芽生长至4㎝高以上，每一节间约0.5-1㎝左右。

（3）增殖。培养基MS+6BA0.2mg/L+NAA0.01-0.03mg/L，蔗糖浓度30g/L，琼脂5g/L，将获得的诱导苗剪成1.5㎝左右的长度接种在本培养基上，20d后获得丛生芽。

（4）复壮。培养基为1/2MS+6BA0.1mg/L+NAA0.01mg/L，蔗糖40g/L，琼脂5.5g/L，将丛生芽切割分离为单株转接至本培养基上，培养20-30d。（5）生根。培养基为1/2MS+IBA0.1-0.2mg/L，蔗糖40g/L，琼脂5.5g/L，将复壮后的单株苗接种到本培养基上培养15d。

（6）炼苗。温室内炼苗，先开瓶炼苗3-4d，然后取出用水洗净根部的培养基，把洗好的瓶苗移栽到泥炭：珍珠岩为6:1的穴盘中，驯化期30d，前期空气湿度90%以上，温度25-28℃，后期空气湿度降低到75%以上，每7d喷施1次多菌灵1000倍液。

（7）移栽。经过驯化后的成苗移栽到营养钵内，基质为泥炭：珍珠岩为体积比6：1；30-50d后换大钵，再长30d后，植株高度30cm左右便可直接移入大田定植。

该方法激素配比合理，培养基经过优化，诱导率显著提高，并且增加了诱导后复壮环节，为后续生根成功打下基础，生根后经炼苗、两次转移训化，稳定后定植大田。诱导率98%，增殖系数4以上，15d生根率80%以上，生根条数为2-4条，生长健壮。移栽成活率95%以上。

具体实施方式

实施例1。

疙瘩杨的组培快繁技术，包括外植体准备、诱导、增殖、生根、炼苗、移栽环节，其特征在于组织培养条件为PH值5.4-5.8，温度25℃-28℃，自然光照12h/d，各步骤及条件如下：

（1）外植体准备。取当年生的无虫害、无病害的健壮的嫩枝条作为外植体，除去多余的叶片和叶柄，抹去枝条上的绒毛，用75%的酒精擦拭一遍茎段和腋芽处。把处理好的茎杆剪成10cm左右，用膜包好放在温度为4℃的冰箱中冷藏12h。将冷藏过后的茎杆在洗洁精水中冲洗干净，在流动的自来水上冲洗1h。将冲洗干净的枝条剪成1.5-2cm的茎段，每一个茎段带一个芽。用75%的酒精：0.1%的升汞为1:3的比例混合液对外枝体进行消毒6-8min，取出后用无菌水冲洗5-6次后备用。