[发明专利]液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序存储介质

说明书

本发明涉及液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序存储介质。在切换多个测定模式来测定HbA1c的情况下，抑制HbA1c的保留时间产生偏移并且缩短测定时间。HPLC装置中，使用液相色谱法，切换通过将多个种类的洗脱液依次输送至分析柱来对测定试样的血红蛋白A1c和变异血红蛋白进行测定的第一测定模式与通过将多个种类的洗脱液中与第一测定模式中使用的洗脱液共通的多种共通洗脱液依次输送至所述分析柱来对血红蛋白A1c进行测定的第二测定模式，在第一测定模式下测定血红蛋白A1c时，以使血红蛋白A1c的第一保留时间与在第二测定模式下测定的血红蛋白A1c的第二保留时间相同的方式，使分析柱平衡化。

技术领域

本发明涉及液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序存储介质，特别涉及血液等生物试样的分析中使用的液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序存储介质。

背景技术

以往，提出了利用液相色谱法对例如血液等测定试样的糖化血红蛋白(HbA1c)和变异Hb进行测定的方法(例如参照专利文献1和非专利文献1)。

以往，在对测定试样的糖化血红蛋白(HbA1c)进行测定的情况下，在检测变异血红蛋白、将其分离或除去来测定HbA1c和变异血红蛋白这两者的情况(变体模式)以及主要测定血红蛋白A1c的情况(快速模式)下，通常是使用分开的测定装置来进行测定或者更换分析柱来进行测定。这是因为，特别是配管中的洗脱液的浓度等条件对测定的精度产生影响，因此，在各个情况下需要使用不同的洗脱液进行测定。因此，以往，在液相色谱装置中，即使是能够进行快速模式和变体模式的测定的装置，在变更测定模式的情况下，也需要柱和配管内的清洗工序和平衡化工序。具体而言，在变更测定模式的情况下，在测定模式结束时在终止程序中对柱和配管内进行清洗后变更测定模式。而且，在变更后的测定模式中，实施用于使柱和配管内达到平衡状态的开始程序。以往，对于多个测定试样切换多个测定模式，不能在不追加多余工序的情况下连续地进行测定。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2009-236768号公报

非专利文献

非专利文献1：Bio-Rad公司“VariantII Dual Program”的目录

发明内容

发明所要解决的问题

如上所述，在变更测定模式的情况下，需要柱和配管内的清洗工序和平衡化工序，因此，洗脱液的使用量增多，并且测定时间也变成长时间。另外，本发明人发现了如下问题：在1台液相色谱装置中，在对多个测定试样切换变体模式和快速模式而连续地进行测定的情况下，有时仅在变体模式下使用的洗脱液会对其下一个测定产生影响，有时使HbA1c的保留时间(retention time)产生偏移。该问题在1台液相色谱装置中在主要仅执行变体模式和快速模式中的任一者的情况下并不怎么成为问题。

但是，在1台液相色谱装置中切换两个测定模式而连续地执行的情况下，如果测定的HbA1c的保留时间存在偏移，则存在如下问题：在使用者基于HbA1c的保留时间来鉴定HbA1c的峰时产生混乱，或者在液相色谱装置中确定HbA1c的峰的过程变得复杂。因此，在1台液相色谱装置中切换两个测定模式来执行的情况下，需要设置充分的切换时间，难以缩短测定时间。

本发明的目的在于提供在切换多个测定模式来测定HbA1c的情况下能够抑制HbA1c的保留时间产生偏移并且能够缩短测定时间的液相色谱测定方法、液相色谱测定装置和液相色谱测定程序存储介质。

用于解决问题的方法

本发明的液相色谱测定方法的一个方式包含：