[发明专利]一种‘阳光’樱组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种‘阳光’樱的组培快繁方法。本发明通过基本培养基设置、不同激素成份及浓度水平配比优化，以成年优株当年生半木质化枝条为外植体，经腋芽诱导、腋芽增殖和生根培养，形成完整植株，移栽到基质后，得到生长整齐、表型一致的健壮苗木。本发明具有繁殖系数高，培育周期短，不受季节限制等优点，诱导率达100％；增殖系数达5.1，增殖芽伸长生长快，培养18d芽高达>2.5cm，有效芽平均达35棵/瓶；生根培养10d，生根率>98％，根数达5条/株以上；组培生根苗健壮、移栽成活率高达92％以上；在实际生产应用中可进行周年规模化快速育苗，生产出健壮、整齐一致的‘阳光’樱容器苗，应用前景广阔。

技术领域

本发明属植物组织培养技术领域，更具体地说，本发明涉及一种‘阳光’樱的组培快繁方法。

背景技术

‘阳光’樱(Cerasus youkou)是天城吉野(C.yedoensis cv.Amagi-yoshin)与寒绯樱(C.campanulata)杂交育成的园艺栽培品种，为落叶乔木，树形杯状；花先叶开放，伞形花序，3朵一束，花朵水平略下垂开展；萼筒长钟状，无毛，暗紫红色或红色，萼片长椭圆形披针形，全缘，无毛；花径3.8～4.6cm，花5瓣，淡红紫色，脉纹明显，先端深2裂；花期3月下旬4月初(长江中下游)、4月上中旬(北京、山东)。其花大色艳，花期与染井吉野相近，可与染井吉野搭配，形成红白相衬的樱花隧道，在日本称之为“樱并木”，受到人们的广泛的喜爱。其观赏价值高，树势强健，抗病抗逆性强，耐热性较好，是目前为数不多能够适应我国南北方气候的观赏樱花品种，发展前景广阔。

目前，‘阳光’樱常规主要采用嫁接进行繁殖，由于受到穗条数量、砧木种类、嫁接时间等因素的限制，其繁殖数量有限，远远满足不了市场需求。常规扩繁速度慢，严重制约了其快速推广应用，迫切需要通过组培快繁技术进行扩繁，以‘阳光’樱成年优株为母株进行组培规模化育苗，促进‘阳光’樱产业化开发，意义现实而重大。

经过文献检索，目前尚未见关于‘阳光’樱组培快繁的报道。若参考现发表樱属植物相关种组培培养基对‘阳光’樱进行组培快繁，会出现组培芽发黄，伸长生长慢，芽小而弱，有效芽数少、玻璃化现象等情况，导致增殖系数小，成苗质量差，繁殖速度慢，生产成本高。

发明内容

本发明的目的在于：克服现有技术中关于‘阳光’樱组培快繁方法匮乏、相关组培培养基对‘阳光’樱组培快繁效果差的问题，提供一种‘阳光’樱的组培快繁方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种‘阳光’樱组培快繁方法，其包括如下步骤：

(1)外植体预处理及采集：剪取外植体前，每隔3～4天用多菌灵或百菌清溶液交替喷洒‘阳光’樱树体2～3次，剪取‘阳光’樱的上半木质化枝条作为外植体(最好在天气晴朗的上午10时左右剪取)，置于紫外灯下照射20～30min，除叶，用洗洁精溶液浸泡5min后，使用棉球或软毛笔蘸洗洁精溶液仔细地轻轻刷洗茎(切勿刷掉叶柄基部的托叶)，然后用纯净水洗净，低温保湿备用；

(2)外植体消毒和腋芽诱导：使用新洁尔灭和升汞对外植体进行消毒，然后接种到诱导培养基上培养得到腋芽，诱导培养基以YG为基本培养基，每升添加6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)0.5～1.5mg、IBA(吲哚丁酸)0～0.2mg、NAA(萘乙酸)0.05～0.2mg、蔗糖20～40g、琼脂6g，pH为5.8～6.0；

(3)增殖培养：将腋芽切下接种到增殖培养基上培养得到增殖苗，增殖培养基以YG为基本培养基，每升添加6-BA 0.4～1.0mg、NAA 0.05～0.2mg、IBA0.05～0.2mg、GA₃(赤霉素)0.5～1.5mg、蔗糖20～40g，琼脂6g，pH为5.8～6.0；

(4)生根培养：将增殖苗的嫩芽切取并接种到生根培养基中培养得到生根苗，生根培养基以1/2YG培养基为基本培养基，每升添加NAA 0.2～0.5mg、IBA0.2～0.5mg、蔗糖15～20g，琼脂6g，pH为5.8～6.0；