[发明专利]转基因针叶树植株的制备方法在审
申请号: | 201710253480.6 | 申请日: | 2017-04-18 |
公开(公告)号: | CN107058382A | 公开(公告)日: | 2017-08-18 |
发明(设计)人: | 朱木兰;卫志明;刘航 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海生命科学研究院 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H4/00;A01H5/00 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司31266 | 代理人: | 崔佳佳,马莉华 |
地址: | 200031 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 转基因 针叶树 植株 制备 方法 | ||
1.一种针叶树植物的转基因方法,其特征在于,包括步骤:
(a)对针叶树植物的种子进行萌发处理,从而获得幼苗;
(b)对所述幼苗进行去根处理,从而获得经去根的幼苗;
(c)将所述经去根的幼苗进行培养,获得经培养的幼苗;
(d)对所述经培养的幼苗的下胚轴进行切取,获得下胚轴切段;
(e)将所述的下胚轴切段作为转基因受体材料,进行转基因处理,从而获得转入外源基因的下胚轴切段;和
(f)任选地,对所述转入外源基因的下胚轴切段进行再生,从而获得转基因的针叶树植物植株。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤(f)中,包括以下一个或多个独立的子步骤:
(f1)对所述转入外源基因的下胚轴切段,在递增的筛选压力条件下,进行筛选培养,获得抗性愈伤组织;
(f2)对愈伤组织进行出芽处理,从而获得抗性不定芽;
(f3)对抗性不定芽进行生根处理,从而获得转基因的针叶树植物植株。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,在步骤(f1)中,所述的递增的筛选压力包括2、3、4、5、6级的递增筛选压力。
4.如权利要求2所述的方法,其特征在于,在步骤(f1)中,在针对所述述抗性筛选基因的第一筛选压力条件、第二筛选压力条件、第三筛选压力条件下,进行筛选培养,获得抗性愈伤组织。
5.如权利要求2所述的方法,其特征在于,在步骤(f2)中,在单级或递增的筛选压力下进行出芽处理。
6.如权利要求2所述的方法,其特征在于,在步骤(f2)中,在针对所述抗性筛选基因的第一筛选压力条件、第二筛选压力条件下,进行筛选培养,获得抗性愈伤组织。
7.如权利要求2所述的方法,其特征在于,在步骤(f3)中,在单级或递增的筛选压力进行生根处理。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述下胚轴切段的长度为1-5mm,较佳地,2-4mm。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述转入外源基因的方法选自下组:农杆菌法、电穿孔法、基因枪法、或其组合。
10.一种转基因材料,其特征在于,所述转基因材料由权利要求1中(a)-(e)的步骤制得。
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