[发明专利]一种受茉莉酸甲酯和白叶枯病菌诱导的启动子、其制备方法和重组表达载体

权利要求书

1.一种受茉莉酸甲酯和白叶枯病菌诱导的启动子，其特征在于，所述受茉莉酸甲酯和白叶枯病菌诱导的启动子含有如序列表中SEQ ID NO.1所示序列。

2.一种制备如权利要求1所述的受茉莉酸甲酯和白叶枯病菌诱导的启动子的方法，其特征在于，所述方法包括：

提取水稻的基因组DNA；

将所述基因组DNA通过如序列表中SEQ ID NO:2所示的上游引物和SEQ ID NO:3所示的下游引物进行PCR扩增，得到PCR扩增产物，即所述受茉莉酸甲酯和白叶枯病菌诱导的启动子。

3.根据权利要求2所述的制备启动子的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系包括：5.8μl ddH₂O、10μl 2×Prime Star GC Buffer、2μl浓度为2.5mM的dNTP mix、0.5μl浓度为10μM的所述上游引物、0.5μl浓度为10μM的所述下游引物、0.2μl Takara Prime StarTaq酶和1μl所述基因组DNA。

4.根据权利要求2所述的制备启动子的方法，其特征在于，所述PCR扩增的程序为：98℃预变性5min；98℃变性30s，59℃退火30s，72℃延伸120s，扩增30个循环；72℃延伸10min。

5.一种受茉莉酸甲酯和白叶枯病菌诱导的重组表达载体，所述受茉莉酸甲酯和白叶枯病菌诱导的重组表达载体包括报告基因，其特征在于，所述重组表达载体还包括位于所述报告基因上游的第一启动子，所述第一启动子为含有序列表中SEQ ID NO.1所示序列的所述受茉莉酸甲酯和白叶枯病菌诱导的启动子。

6.根据权利要求5所述的重组表达载体，其特征在于，所述表达载体以pCAMBIA1381为骨架载体。

7.根据权利要求5所述的重组表达载体，其特征在于，所述报告基因为β-葡萄糖苷酸酶基因。

8.根据权利要求5所述的重组表达载体，其特征在于，所述报告基因下游的第一终止子为Nos ter。

9.根据权利要求5所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体还包括顺序连接的第二启动子、选择标记和第二终止子。

10.根据权利要求9所述的重组表达载体，其特征在于，所述第二启动子为35S Pro，所述选择标记为潮霉素抗性基因，所述第二终止子为35S ter。