[发明专利]一种通过超声波复合酶制剂处理高温豆粕分离纯化制备水溶性糖肽的方法

权利要求书

1.一种通过超声波复合酶制剂处理高温豆粕分离纯化制备水溶性糖肽的方法，其特征在于所述方法步骤如下：

(1)原料的选取与处理

选取高温豆粕为原料，打碎，过筛，备用；

(2)超声波复合纤维素酶酶解处理

将步骤(1)中选取的高温豆粕用热水充分溶解，控制高温豆粕浓度为2～10g/100ml，进行超声波和纤维素酶酶解处理；

(3)蛋白酶酶解处理

将步骤(2)中制得的酶解液加入蛋白酶进行酶解，酶灭活，用HCl调节为酸性，离心，取上清液调至中性；

(4)粗品糖肽的制备

将步骤(3)中制得酶解上清液过滤，取滤液加入乙醇沉淀，放置24～48h，沉淀复溶，冷冻干燥，得到粗品糖肽；

(5)纯品糖肽的制备

将步骤(4)中制得的粗品糖肽用缓冲液溶解，依次进行离子交换层析、透析、凝胶色谱层析，冷冻干燥，得到纯品糖肽。

2.根据权利要求1所述的通过超声波复合酶制剂处理高温豆粕分离纯化制备水溶性糖肽的方法，其特征在于所述步骤(1)中，热水温度为60～70℃，高温豆粕打碎过40～100目的筛子。

3.根据权利要求1所述的通过超声波复合酶制剂处理高温豆粕分离纯化制备水溶性糖肽的方法，其特征在于所述步骤(2)中，超声波和纤维素酶酶解处理的方法为：超声波同步纤维素酶酶解处理。

4.根据权利要求1或3所述的通过超声波复合酶制剂处理高温豆粕分离纯化制备水溶性糖肽的方法，其特征在于所述步骤(2)中，超声波处理的条件为：超声功率100～400W，超声时间10～60min；纤维素酶酶解条件为：纤维素酶酶活添加量300～1500U、纤维素酶酶解pH值为3.5～5.5。

5.根据权利要求1所述的通过超声波复合酶制剂处理高温豆粕分离纯化制备水溶性糖肽的方法，其特征在于所述步骤(3)中，蛋白酶为碱性蛋白酶。

6.根据权利要求1所述的通过超声波复合酶制剂处理高温豆粕分离纯化制备水溶性糖肽的方法，其特征在于所述步骤(4)中，过滤为抽滤器过滤。

7.根据权利要求1所述的通过超声波复合酶制剂处理高温豆粕分离纯化制备水溶性糖肽的方法，其特征在于所述步骤(4)中，乙醇为无水乙醇，滤液中乙醇终浓度为60～90％。

8.根据权利要求1所述的通过超声波复合酶制剂处理高温豆粕分离纯化制备水溶性糖肽的方法，其特征在于所述步骤(5)中，缓冲液为0.01M Tris-HCl，pH值为7.2。

9.根据权利要求1所述的通过超声波复合酶制剂处理高温豆粕分离纯化制备水溶性糖肽的方法，其特征在于所述步骤(5)中，离子交换层析采用DEAE Cellulose 52离子柱。

10.根据权利要求1所述的通过超声波复合酶制剂处理高温豆粕分离纯化制备水溶性糖肽的方法，其特征在于所述步骤(5)中，凝胶色谱层析采用Sephadex G-25柱层析，用去离子水为洗脱液进行洗脱。