[发明专利]一种复合植物蛋白肥料的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物材料加工技术领域，尤其是涉及一种由混合菌种发酵制备复合植物蛋白肥料的方法。

背景技术

葵花籽与亚麻籽都是我国的主要油料作物之一，经榨油后得的饼粕产量非常大，其蛋白含量均高达30～40％，氨基酸种类齐全，是营养价值较高的植物蛋白质来源，而且，葵花籽粕中B族、烟酸、硫胺素和胆碱的含量高，微量元素钙、钾含量及蛋氨酸也较一般饼粕类高，葵花籽蛋白质效率比值为2：1，消化率(TD)82％，生物效价(BV)70％，净利用率(NPU)57％；亚麻籽粕中还含量木脂素、a-亚麻酸等生物活性物质，亚麻籽蛋白中必需氨基酸组成相当理想，含较多的天门冬氨酸、谷氨酸、精氨酸等；亚麻粕含木脂素20mg/g，是植物雌激素的一种形式，具有多种生物活性，如抗真菌、抗氧化、提高机体免疫力等。

然而，这两种渣粕基本作为低廉的动物饲料，未能得到充分和有效地利用，其中一个主要的原因是葵花籽粕中含有较多的绿原酸等酚类化合物，从葵花籽粕中提取葵花籽蛋白时，绿原酸很容易氧化成绿色的醌，使蛋白质产品呈深褐色或棕褐色，醌一旦形成便极易与蛋白质分子极性基团、氨基酸结合，而不易被非反刍动物和家禽等消化，降低了蛋白质的营养价值，而且绿原酸也是精氨酸的抑制剂，因此绿原酸被认为是一种抗营养因子；亚麻籽粕中生氰糖苷为主的有毒物质，大大地限制了亚麻籽粕的综合利用，不能最大化地把亚麻籽资源优势转变为经济优势。

因此，有效消除葵花籽粕与亚麻籽粕中的抗营养因子与有毒物质，充分利用蛋白，使饼粕成为廉价易得的优质蛋白新来源，是目前急需解决的问题。饼粕的脱毒和蛋白的高效利用，仅用简单的物理或化学方法难以达到较好的效果，利用微生物数量大、酶系复杂的特点对饼粕进行发酵，可以对生氰糖苷与绿原酸进行消除，提高了粗蛋白的含量。同时，利用微生物蛋白酶系使蛋白降解为多肽，提高蛋白的营养价值与功能性质，而且有利于动植物的吸收。

因此，采用微生物发酵法制备一种复合植物蛋白肥料，不仅能在发酵过程中消除抗营养因子与有毒物质，提高蛋白质的含量，而且该肥料还能为动植物提供较多的微量元素及生物活性物质。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明申请人提供了一种复合植物蛋白肥料的制备方法。本发明方法不仅能在发酵过程中消除抗营养因子与有毒物质，提高蛋白质的含量，而且该肥料粗蛋白含量高，还能为动植物提供较多的微量元素及生物活性物质。

本发明的技术方案如下：

一种复合植物蛋白肥料的制备方法，具体步骤如下：

(1)将葵花籽粕、亚麻籽粕与麸皮按比例混合后，加水得到固态发酵培养基；

(2)菌种种子液的制备；

(3)混合菌种的制备；

(4)将混合菌种接种到固态培养基中，混合发酵；

(5)将发酵产物干燥、粉碎，制得所述复合植物蛋白肥料。

步骤(1)中所述的葵花籽粕、亚麻籽粕、麸皮的质量比为3～5:5～3:2。

步骤(1)中所述的固态发酵培养基的含水量控制在40～60％。

步骤(2)中所述菌种种子液的制备过程中用到的菌株为实验室自行分离制得，初始菌种均购自江苏省微生物研究所；所述菌种种子液的制备过程包括：

A、制备植物乳杆菌种子液：将保菌管中的菌体活化3代，然后接种到MRS培养基中，培养温度为35～37℃，时间18～24h，静置培养，得到菌种种子液；

B、制备地衣芽孢乳杆菌种子液：将保菌管中的菌体活化3代，然后接种到营养琼脂培养基中，培养温度为26～30℃，时间18～24h，静置培养，得到菌种种子液；

C、制备枯草芽孢乳杆菌种子液：将保菌管中的菌体活化3代，然后接种到营养琼脂培养基中，培养温度为26～30℃，时间18～24h，静置培养，得到菌种种子液；

D、制备巨大芽孢乳杆菌种子液：将保菌管中的菌体活化3代，然后接种到营养琼脂培养基中，培养温度为26～30℃，时间18～24h，静置培养，得到菌种种子液；

E、制备酵母菌种子液：将保菌管中的菌体活化3代，然后接种到YPD培养基中，培养温度为26～30℃，时间18～24h，静置培养，得到菌种种子液。

步骤(3)中所述混合菌种的制备：将静置培养后的植物乳杆菌种子液、地衣芽孢杆菌种子液、枯草芽孢杆菌种子液、巨大芽孢杆菌与酵母菌种子液按质量比1～3:1～3:2～4:1～3:1～3制成混合菌种。

步骤(4)中所述的菌种添加量为5～10％，以湿基为准；菌种在固态培养基中发酵，密闭发酵48～72h，温度为28～32℃。