[发明专利]一种血涂片自聚焦显微成像方法

权利要求书

1.一种血涂片自聚焦显微成像方法，其特征在于，包括放置血涂片的载物台、驱动载物台运动的聚焦电机及载物台运动过程中拍摄血涂片图片的拍摄设备，所述显微成像方法中包括：

S1制备血涂片并将其置于载物台上，所述载物台位于聚焦起点；

S2聚焦电机驱动载物台以第一预设速度朝向聚焦终点运动；

S3在步骤S2载物台运动过程中，拍摄设备以预设频率拍摄血涂片的图片，并记录拍摄位置；

S4采用聚焦评价函数对获取的图片进行处理，通过处理后的图片得到焦平面所在位置，进而得到血涂片中白细胞的清晰成像。

2.如权利要求1所述的显微成像方法，其特征在于，在步骤S4中，所述聚焦评价函数采用下式改进的灰度方差法：

$F_{\mathrm{mod}\_\mathrm{var}}=\frac{1}{H\·W\·u}\underset{x}{\Σ}\underset{y}{\Σ}{\left(i\right(x,y)-u)}^2$

$u=\frac{1}{H\·W}\underset{x}{\Σ}\underset{y}{\Σ}i(x,y)$

其中，H为图片中有效像素的高度值，W为图片中有效像素宽度，i(x,y)为图片中各像素点的灰度值。

3.如权利要求2所述的显微成像方法，其特征在于，在步骤S4中还包括采用下式减少相邻像素点相似性的步骤：

|i(x,y)-i(x+1,y)|≤TH

|i(x,y)-i(x,y+1)|≤TH

其中，i(x+1,y)为i(x,y)在水平方向上相邻点像素点的灰度值，x和y为图片中像素点坐标，i(x,y+1)为i(x,y)在垂直方向上相邻点像素点的灰度值，TH为预设阈值。

4.如权利要求1-3任意一项所述的显微成像方法，其特征在于，在步骤S3之后还包括：

S5根据预设规则将拍摄设备拍摄的图片裁剪为预设大小；

在步骤S4中，采用聚焦评价函数对裁剪后的图片进行处理，通过处理后的图片得到焦平面所在位置，进而得到血涂片中白细胞的清晰成像。

5.如权利要求4所述的显微成像方法，其特征在于，在步骤S5，所述预设规则具体包括：

当拍摄设备拍摄的图片存在梯度大且对比度大的区域，以该区域为中心裁剪出预设大小，其中，梯度大小由不同图片的梯度值比较得到，对比度大小由同一图片不同区域的对比度值比较得到；

当拍摄设备拍摄的图片不存在梯度大且对比度大的区域，以该图片的中心点为中心裁剪出预设大小。

6.如权利要求1或2或3或5所述的显微成像方法，其特征在于，在步骤S4之后还包括：

S6根据步骤S4的图片处理结果，结合PID控制算法形成闭环控制系统，控制聚焦电机以第二预设速度运动，自动找到最佳焦平面所在位置。