[发明专利]一种ASE‑HPLC法测定蓖麻子中蓖麻碱含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于化学检测领域，尤其是一种ASE-HPLC法测定蓖麻子中蓖麻碱含量的方法。

背景技术

《中国药典》2015年版一部制备供试品方法：取本品粉末(过二号筛)约2.5g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚(60～90℃)适量，加热回流提取4小时，弃去石油醚液，药渣挥去溶剂，转移至具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

该方法耗时长，对技术人员的专业水平要求较高。

发明内容

针对上述不足，本发明旨在提供一种ASE-HPLC法测定蓖麻子中蓖麻碱含量的方法，该方法萃取时间短、检测精度高。

为了实现上述技术效果，本发明提供的技术方案是这样的：一种ASE-HPLC法测定蓖麻子中蓖麻碱含量的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：

步骤1：采用ASE法萃取蓖麻子粉末，并收集甲醇萃取液；

步骤2：采用HPLC法测定甲醇萃取液中的蓖麻碱的含量。

优选地，所述的步骤1依次包括下述子步骤：

步骤S1：将蓖麻子样品粉碎，过二号筛，取1g与1g硅藻土混合；

步骤S2：将步骤S1所得的混合物装于放有滤膜的ASE萃取池中，加硅藻土至与池口平行；

步骤S3：用正己烷萃取除杂，再用50％甲醇萃取，结束后，用甲醇将其定容至25ml。

优选地，步骤S3所述的除杂参数为：压力为1500psi，温度为80℃，时间为5min，次数为3次，冲洗体积为80％，吹扫时间为100s。

优选地，步骤S3所述的提取参数为：压力为1500psi，温度为110℃，时间为5min，次数为1次，冲洗体积为80％，吹扫时间为100s。

优选地，步骤2所述的HPLC法的检测参数如下：色谱柱为Thermo Syncronis Dim.AQ；柱温为40℃；流速为0.3mL/min；流动相为水-乙腈；检测波长为307nm。

优选地，所述的色谱柱的规格为1.7μm，50×2.1mm。

优选地，所述的流动相为体积比等于90：10的水-乙腈。

优选地，所述的ASE萃取池的体积为10ml。

本发明与传统方法相比，具有以下优点：

1、本发明曾对快速溶剂萃取使用的溶剂进行考察，《中国药典》使用石油醚加热回流1h除酯后，采用50％甲醇加热回流1h，杂质较少。而石油醚易挥发，易燃，故采用极性相对较接近的正己烷作为除杂溶剂，甲醇、50％甲醇作为提取溶剂进行了溶剂考察，结果显示正己烷除杂，50％甲醇提取后蓖麻碱含量与2015年版《中国药典》含量一致，且杂质峰基本相同，故采用与药典一致的提取溶剂。

2、在除杂过程中，药典方法加入石油醚加热回流4h，时间相对较长，石油醚易挥发，易燃，我们采用了多次萃取除杂的方式，发现80℃，提取5min，3次即可达到除去大部分杂质，再多的提取时间和次数已经无明显影响，而相对高的温度对提取效果影响不大，故最终确定最佳除杂工艺组合为提取温度80℃，提取时间5min，提取次数3次。提取过程中采用110℃。提取5min，提取2次即可达到与药典含量接近，更多的提取时间、温度、次数对结果已经无明显影响。最终确定最佳提取工艺组合为提取温度110℃，提取时间5min，提取次数1次。

附图说明

图1为以蓖麻子对照品的浓度(mg/ml)-峰面积进行线性回归图；

图2为蓖麻子对照品的色谱图；

图3为采用ASE法萃取所得的供试品溶液的色谱图；

图4为采用药典方法提取所得的供试品溶液的色谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围内所做的有限次修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。

实施例1

1、仪器设备及试剂

1.1仪器：

电子分析天平(XA205DU)、ASE350快速溶剂萃取仪(美国DIONEX公司)、Thermo U3000UHPLC液相色谱仪

1.2水：符合GB/T 6682规定的一级水。

2、方法

2.1对照品溶液的制备：取蓖麻碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含柚皮苷0.17mg的溶液，即得。

2.2供试品溶液的制备