[发明专利]一种乙肝病毒抗原肽联合肝癌细胞抗原信息的抗原提呈信号群及其应用

说明书

本发明公开了一种乙肝病毒（HBV）抗原肽联合肝癌细胞抗原信息的抗原提呈信号群及其应用，信号群由HBV核心抗原18‑27肽段、HBV前S2抗原44‑53肽段和人肝癌细胞株HepG2裂解液组成，HBV核心抗原18‑27肽段、HBV前S2抗原44‑53肽段和人肝癌细胞株HepG2裂解液三者的质量比为0.5～1：0.5～1：1～2。通过该信号群所诱导的DC细胞成为携带多重特异性乙肝病毒相关性肝癌的抗原信号的DC疫苗，可激活肿瘤特异性T细胞的增殖和功能，从而加强其抗击乙肝肝癌的作用。

技术领域

本发明涉及乙肝病毒相关性肝癌的特异性细胞免疫治疗技术领域，具体地，涉及一种乙肝病毒抗原肽联合肝癌细胞抗原信息的抗原提呈信号群及其应用，具体应用为活化树突状细胞诱导T细胞的应用。

背景技术

与全球癌症总体死亡率持续下降成鲜明对比，肝癌发病率和死亡率逐年上升，最新流行病学数据显示，肝癌年发病为78.2万人，死亡病例74.5万，平均5年生存率低于5%，总体生存时间只有10个月；我国占了全球肝癌55%，成为肝癌发病和死亡人数最多的国家，其中85%以上患者有HBV感染病史，几乎所有癌细胞都含有HBV基因。然而，治疗手段在20年进步不大，常用方法有手术（肿瘤切除和移植）和局部治疗（射频、消融、微波、冷冻、无水酒精注射、肝动脉化疗栓塞，TACE），50～60%患者初诊时已经到了中晚期，没有手术机会，局部治疗疗效与无治疗患者比较2年生存率最多增加14%，且有一定的毒副作用，严重者引发肝衰竭，因此，肝癌成为我国沉重的经济负担和人民健康杀手。

传统抗癌药在肿瘤耐药复发和进展时基本无效，且细胞毒性大，抗肿瘤免疫治疗能够在一定程度避免该问题，其中肿瘤特异性T细胞最具潜力，T细胞能通过在血液中“游走巡查”找到肿瘤进行攻击，近期研究证实，癌症T细胞免疫疗法能持续缓解某些血液肿瘤改善总生存率；然而，肿瘤内T细胞低含量制约着免疫疗法的成功扩展。肿瘤免疫学核心理论指出，担负人体最大抗原递呈功能的树突状细胞（DCs）是T细胞活化和增殖的关键启动者，在T细胞成熟、分化、增殖各阶段发挥重要作用，活化DC能有效激活T细胞的抗肿瘤免疫效应，因此，通过恢复DC对T细胞功能有增强作用。近年来一些临床研究利用疫苗治疗中晚期肿瘤，包括体外DC负载肿瘤抗原进行回输或诱导肿瘤内DC以递呈内源性抗原，提示改善抗原递呈促进功能性T细胞具有一定潜力和前景。

根据慢性HBV感染的核心理论为机体对病毒的免疫耐受以及乙肝肝癌中存在大量的淋巴细胞浸润，提示控制肿瘤进展和攻击/消灭癌细胞依赖于数量足够功能强大的特异性T细胞，通过产生或增强免疫反应治疗乙肝病毒相关性肝癌（HBV-HCC）拥有巨大的潜能。目前围绕某些癌症进行免疫治疗的临床研究疗效初步呈现，但由于肿瘤细胞和免疫细胞相互作用、彼此制衡十分明显，诱导产生的特异性T细胞数量和功能不全，未能较好地在实体肿瘤中发挥抑制作用。其中主要的技术难点在于：（1） HBV-HCC带有高度异质性的肿瘤抗原，具有多样性、复杂性、变异性，能帮助癌细胞轻易逃避免疫系统的监测；（2） HBV-HCC内部形成的免疫抑制性微环境，使免疫细胞难以攻破其“保护网”。

发明内容

本发明为了解决目前免疫治疗以肝癌为代表的实体肿瘤疗效欠佳的主要技术难点，包括实体肿瘤所具有的高度异质性、多样性、复杂性、变异性的抗原特点，提供一组乙肝病毒抗原肽联合肝癌细胞抗原信息的抗原提呈信号群（COST）。通过该信号群所诱导的DC细胞成为携带多重特异性乙肝病毒相关性肝癌的抗原信号的DC疫苗（COST-DC），可激活肿瘤特异性T细胞的增殖和功能，从而加强其抗击乙肝肝癌的作用。

本发明的另一个目的是提供一种携带多重特异性乙肝病毒相关性肝癌的抗原信号的DC疫苗。

本发明的再一个目的是提供一种乙肝肝癌杀伤性T细胞。

本发明的再一个目的是提供一种治疗乙肝肝癌的COST-DC-CTL细胞制剂。

为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案予以实现的：