[发明专利]一种定量组培苗硝酸盐利用效率的方法

权利要求书

1.一种定量组培苗硝酸盐利用效率的方法，其特征在于：包含以下步骤：

第一，通过组织培养获得被考察植物的无性系组培苗；

第二，配置不同硝酸盐浓度的培养基，测定用于配置上述培养基的硝酸盐药品的稳定氮同位素值δ¹⁵N_substrate；

第三，分别将无性系组培苗接种在上述不同硝酸盐浓度的培养基中进行培养；

第四，分别取出经过上述培养的无性系组培苗的叶片，测定组培苗叶片的稳定氮同位素值δ¹⁵N_foliar；

第五，根据测定的组培苗叶片稳定同位素值δ¹⁵N_foliar，计算出各硝酸浓度梯度下的组培苗同位素同化比Ns；

第六，以酶动力学的米氏方程建立稳定氮同位素同化比与硝酸盐浓度的关系模型；

第七，对上述模型求导，得出组培苗硝酸盐利用效率方程；

第八，依据上述组培苗硝酸盐利用效率方程，确定被考察的组培苗的硝酸盐最大利用效率NUE_max；

第九，将被考察的培养基中硝酸盐浓度作为C代入组培苗硝酸盐利用效率方程中，可求出在被考察的硝酸盐浓度下的组培苗硝酸盐利用效率NUE；在第六步骤中，米氏方程的表达式为：这里的Ns为组培苗同位素同化比，C为培养基中硝酸盐浓度，Ns_max和Km值为米氏方程的常数；在第七步骤中，组培苗硝酸盐利用效率方程为这里的NUE为组培苗硝酸盐利用效率，Ns'为Ns对C的求导；在第八步骤中，被考察的组培苗的硝酸盐最大利用效率NUE_max为C＝0时的NUE,

2.根据权利要求1所述的一种定量组培苗硝酸盐利用效率的方法，其特征在于：在第三步骤中，分别将带有1个单芽的无性系组培苗接种在上述不同硝酸盐浓度的培养基中，培养时间超过4周。

3.根据权利要求1所述的一种定量组培苗硝酸盐利用效率的方法，其特征在于：在第四步骤中，分别取出100mg以上的上述经过4周以上培养的无性系组培苗的叶片，测定组培苗叶片的稳定氮同位素值δ¹⁵N_foliar。

4.根据权利要求1所述的一种定量组培苗硝酸盐利用效率的方法，其特征在于：在第五步骤中，组培苗稳定氮同位素同化比Ns为组培苗叶片稳定氮同位素值δ¹⁵N_foliar与硝酸盐的稳定氮同位素值δ¹⁵N_substrate的比值。