[发明专利]一种犬瘟热、犬细小抗体的ELISA检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种犬瘟热、犬细小抗体的ELISA检测试剂盒。

背景技术

在我国，随着社会经济发展方式的转变，养犬业、毛皮动物养殖业和野生动物保护业，其规模在不断扩大；随着人们生活质量的不断提高，宠物犬的饲养量在也逐年增加，而对这些行业发展造成最大影响的就是犬类传染病的爆发，对于这些传染病的预防与控制形式也愈加严峻。在犬类疫病中，犬瘟热和犬细小是发病率及死亡率都较高的疫病。犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的一种高度接触性传染病，传染性极强，死亡率可达80％以上。犬瘟热初期狗的体温高达39.5-41摄氏度，食欲不振，精神沉郁，眼鼻流出水样分泌物，打喷嚏，有腹泻症状。在以后2-14天内再次出现胃肠道疾病，呕吐、拉稀，有脓性笔体、脓性眼屎，精神高度沉郁，嗜睡。犬瘟热发病后期会出现典型的神经症状，口吐白沫，抽搐，但以冬、春多发，犬是主要的自然宿主。而犬类感染细小病毒后发病急，死亡率高，常呈爆发性流行；不同年龄、性别、品种的犬均可感染，但八月龄以内的幼犬最易感染且死亡率高达70％。病犬和康复带毒犬经粪便、尿液、唾液和呕吐物向外界排毒后污染饲料、饮水、食具及周边环境。健康犬直接接触病犬或者进入被污染环境通过消化道感染。

我国的犬类疫病防控缺乏有效的综合防控体系，既不利于犬类疫病防控，也不利于人类的身体健康。犬类经过接种疫苗后往往存在一种情况，即不知道免疫效果如何，导致了有些犬接种疫苗以后仍然发病，而市面上流行的试剂盒往往只能检测犬瘟热或犬细小，这两种常见病通常需要购买2个试剂盒进行检测，无形中增大了工作量，工作繁琐。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种方便、高效、通过检测血清抗体来判断接种疫苗后的犬类免疫保护状况的犬瘟热、犬细小抗体的ELISA检测试剂盒。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是一种犬瘟热、犬细小抗原的ELISA检测试剂盒，包括ELISA板条、血清稀释液和浓缩洗涤液、底物显色液、终止液、酶标单克隆抗体、阳性对照和阴性对照；

上述ELISA板条：每个试剂盒装有1块ELISA微孔板，每块ELISA板条为能自行拆卸的已包被抗原的ELISA微孔板，包被抗原为原核表达的H蛋白及VP2基因，规格为6孔×10条；

上述血清稀释液为即用型；

上述浓缩洗涤液为20倍浓缩；

上述底物显色液为即用型TMB显色液，10ml；

上述终止液为2mol/L的H₂SO₄溶液，10mL；

上述酶标单克隆抗体为：辣根过氧化物酶标记的兔抗犬IgG多克隆抗体，使用前100倍稀释；

上述阳性对照为：经高温灭活的经疫苗免疫后的犬血清稀释液；

上述阴性对照为：经高温灭活的未患病，且未经疫苗免疫的犬血清稀释液。

本发明还公开了上述的检测犬瘟热、犬细小抗原的ELISA检测试剂盒在检测犬瘟热、犬细小IgG抗原中的应用。

本发明一种犬瘟热、犬细小抗体的ELISA检测试剂盒具有如下优点：两种检测方法整合至一个试剂盒，给使用者提供了方便且降低了使用成本。

附图说明

图1是本发明中犬瘟热、犬细小抗原的ELISA检测试剂盒；

其中：1.犬瘟热病毒H蛋白；2.犬细小病毒VP2基因。

具体实施方式

本发明一种犬瘟热、犬细小抗原的ELISA检测试剂盒，包括ELISA板条、血清稀释液和浓缩洗涤液、底物显色液、终止液、酶标单克隆抗体、阳性对照和阴性对照；

上述ELISA板条：每个试剂盒装有1块ELISA微孔板，每块ELISA板条为能自行拆卸的已包被抗原的ELISA微孔板，包被抗原为原核表达的H蛋白及VP2基因，规格为6孔×10条；

上述血清稀释液为即用型；

上述浓缩洗涤液为20倍浓缩；

上述底物显色液为即用型TMB显色液，10ml；

上述终止液为2mol/L的H₂SO₄溶液，10mL；

上述酶标单克隆抗体为：辣根过氧化物酶标记的兔抗犬IgG多克隆抗体，使用前100倍稀释；

上述阳性对照为：经高温灭活的经疫苗免疫后的犬血清稀释液；

上述阴性对照为：经高温灭活的未患病，且未经疫苗免疫的犬血清稀释液。

本发明还公开了上述的检测犬瘟热、犬细小抗原的ELISA检测试剂盒在检测犬瘟热、犬细小IgG抗原中的应用。

一、抗原制备