[发明专利]一种pH敏感型透明质酸-多柔比星纳米前药的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种pH敏感型透明质酸-多柔比星纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)室温、EDC/NHS组合催化剂存在条件下，4-氨甲基苯甲酸甲酯的氨基与高分子载体透明质酸的羧基发生酰胺化反应，经透析、冷冻、干燥得到产物A，其反应式为：

(b)在60℃加热回流、氮气保护条件下，产物A的甲氧基与水合肼反应形成联氨，经透析、冷冻、干燥得到产物B，其化学反应式为：

(c)室温、避光条件下，产物B的肼基与多柔比星的羰基反应形成具有pH敏感性的腙键，制备得到具有pH敏感性的两亲性高分子前药，其化学反应式为：

(d)具有pH敏感性的两亲性高分子前药采用超声辅助自组装法制备得到高分子纳米颗粒。

2.根据权利要求1所述的一种pH敏感型透明质酸-多柔比星纳米颗粒的制备方法，其特征在于：步骤(a)中原料透明质酸、EDC、NHS、4-氨甲基苯甲酸甲酯的投料摩尔比为1：1.27：1.27：1.27。

3.根据权利要求1所述的一种pH敏感型透明质酸-多柔比星纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤(a)具体为：将透明质酸溶于甲酰胺中，搅拌条件下分别向溶液中加入EDC·HCl和NHS得混合溶液M，将4-氨甲基苯甲酸甲酯溶于甲酰胺中得混合溶液N，将混合溶液N逐滴加入到混合溶液M中，搅拌反应24h后经蒸馏水透析、冷冻、干燥得产物A。

4.根据权利要求1所述的一种pH敏感型透明质酸-多柔比星纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤(b)具体为：将产物A溶于甲酰胺中，再加入过量水合肼，氮气保护下于60℃回流反应16h，经真空除杂、蒸馏水透析、冷冻、干燥后获得产物B。

5.根据权利要求1所述的一种pH敏感型透明质酸-多柔比星纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤(c)具体为：将产物B溶于甲酰胺中，再加入多柔比星和催化剂三乙胺，室温下搅拌反应48h后过滤，经真空除杂、蒸馏水透析、冷冻、干燥后获得具有pH敏感性的两亲性高分子前药，其中产物B与多柔比星、三乙胺的摩尔比为2:1:5。

6.根据权利要求1所述的一种pH敏感型透明质酸-多柔比星纳米颗粒的制备方法，其特征在于，步骤(d)具体为：将具有pH敏感性的两亲性高分子前药溶于pH＝7.4的磷酸盐缓冲液中，得到浓度为5mg/mL的高分子前药溶液，接着对其进行超声处理，超声脉冲宽度5.0s，间歇时间2.0s，超声功率100w，超声处理时间5min。

7.根据权利要求1-6任一项所述的一种pH敏感型透明质酸-多柔比星纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述4-氨甲基苯甲酸甲酯可替换为4-氨甲基苯甲酸乙酯、4-氨乙基苯甲酸甲酯、4-氨乙基苯甲酸乙酯中的一种。