[发明专利]用于前列腺癌进展预后的检测试剂及试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于前列腺癌进展预后的检测试剂及试剂盒。按照每张临床样本组织切片的剂量，本发明所述的检测试剂包括：内源性过氧化物酶阻断剂50ul；动物非免疫血清50ul；一抗为兔源抗TCF12多克隆抗体1ul；生物素标记的二抗50ul；链霉菌抗生物素蛋白‑过氧化物酶50ul；DAB显色试剂100ul；磷酸缓冲盐溶液(PBS缓冲液)200ul。本发明所述的检测试剂及检测试剂盒能通过检测TCF12在前列腺癌临床样本中的表达状态而预测前列腺癌进展，可以区分临床前列腺癌患者的不同疾病进展及预后，可用于前列腺癌生化复发、肿瘤转移等预后诊断。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体来说涉及的是一种用于前列腺癌进展预后的检测试剂以及相关试剂盒。

背景技术

北美地区男性恶性肿瘤中，前列腺癌(PCa)依旧是发病率最高的肿瘤，死亡率仅次于肺癌。而我国男性前列腺癌发病率呈明显上升趋势，在男性泌尿生殖系统位居第二位，仅次于膀胱肿瘤。临床治疗前列腺癌有激素、手术、放射等有效治疗方法，但是，仍有许多前列腺癌患者最终都由于前列腺的进展(生化复发、肿瘤转移)而死亡，因此临床医生迫切需要寻找更好的临床进展预后标记物来筛出需要进一步干预治疗的患者，并依此制定出更合适的治疗方案。

转录因子12(Transcription factor 12，TCF12)是helix-loop-helix蛋白家族的一份子，其功能多样化，能在多种组织中表达。能形成二聚体和异二聚体，影响细胞发生发展和分化。在胆管癌、乳腺癌、直肠癌中均有研究表明会影响肿瘤的恶性进展和不良预后，可作为肿瘤的进展及预后的预测因子之一。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于前列腺癌进展预后的检测试剂，它能通过检测TCF12在前列腺癌临床样本中的表达状态而预测前列腺癌进展，可以区分临床前列腺癌患者的不同疾病进展及预后。

本发明所述的用于前列腺癌进展预后的检测试剂，按照每张临床样本组织切片的剂量，所述检测试剂包括：内源性过氧化物酶阻断剂50ul；动物非免疫血清50ul；一抗为兔源抗TCF12多克隆抗体1ul；生物素标记的二抗50ul；链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶50ul；DAB显色试剂100ul；磷酸缓冲盐溶液(PBS缓冲液)200ul。

本发明的另一目的在于提供前列腺癌进展预后的检测试剂盒，可用于前列腺癌生化复发、肿瘤转移等预后诊断。

本发明所述的用于前列腺癌进展预后的检测试剂盒，包括本发明所述的检测试剂。

本发明所述的用于前列腺癌进展预后的检测试剂及试剂盒具有以下优点：第一次阐述TCF12的表达水平跟前列腺癌患者术后PSA生化复发、肿瘤转移和Gleason(GS)评分存在关系，能为前列腺癌患者的疾病诊治提供了可靠的方法，并且操作简单、快速，无需其他特殊仪器，可应用于一般医院实验室或者病理室，有望成为前列腺癌疾病诊断的新技术。

具体实施方式

以下通过前列腺癌患者临床芯片样本进行TCF12的多克隆抗体染色试验，并结合临床样本数据来进一步证明本发明对预测前列腺癌术后PSA生化复发、肿瘤转移和Gleason评分(GS)的有利效果，证明本发明能有效预测前列腺癌患者的疾病进展。

实验步骤：

1)将临床组织从液氮中取出，将该组织装入包埋盒中保存；

2)用自来水连续冲洗5小时；

3)放入leica自动脱水机中进行组织脱水；

4)进行石蜡包埋组织；

5)将包埋好的石蜡组织块进行连续切片，厚度约为4μm；

6)将切好的片子在60℃的恒温烤箱中放置约2个小时；

7)放入leica自动脱蜡机中进行组织切片脱蜡(包括二甲苯和梯度酒精脱蜡)；