[发明专利]一种提高结肠癌PDX模型成功率的方法

说明书

本发明涉及医学领域，涉及动物模型的建立方法，具体涉及人结肠癌移植瘤小鼠模型的建立方法。本发明针对现有结肠癌建立模型成功率低、不稳定的缺陷，建模前使用前列腺素E2预处理小鼠，将离体的患者的原位肿瘤接种到免疫缺陷小鼠（Balb/c或NOD/SCID）体内制作临床前肿瘤模型，提供了一种能够提高结肠癌PDX模型成功率的方法，尤其是一种高浸润、高转移、稳定的人结肠癌移植瘤小鼠模型的制备方法。本发明对结肠癌临床前期评估、治疗和预后观察具有重要的价值。

技术领域

本发明涉及医学领域，涉及动物模型的建立方法，具体涉及人结肠癌移植瘤小鼠模型的建立方法。

背景技术

结肠癌是一种胃肠外科常见的恶性消化道肿瘤，发病率及病死率均较高。2010年，我国结直肠癌新病发生率在男性中占第5位（23.38%），女性中占第3位（18.30%），死亡率分别占11.39%和8.64%，且随着年龄的增长而升高。为研究发现新药的特异性靶点和准确预测疗效，肿瘤动物模型研究不可或缺。

目前用于临床前研究的动物肿瘤模型主要有三种：转基因模型（geneticallyengineered models，GEMs），细胞系来源的移植模型和患者来源的瘤块或细胞移植模型（patient-derived xenografts，PDX）。GEMs常涉及相应目标化合物临床前评估的高度特异性靶分子，但是，疗效的评价会受到肿瘤生长延迟和GEMs仅能代表单一靶肿瘤模型这一客观事实的影响。由于小鼠与人类基因和各种生物学特性的差异较大，鼠源肿瘤动物模型在临床和药物开发的应用和价值受到限制。动物肿瘤移植模型是目前应用最多的模型，即用人源肿瘤组织或细胞移植到动物体内所形成的肿瘤动物模型。PDX是将患者的原位肿瘤接种到免疫缺陷小鼠（Balb/c或NOD/SCID）体内用于制作临床前肿瘤模型，其优势在于可以在小鼠体内维持肿瘤的分子学、基因学及病理组织学的异质性。

结肠癌组织移植前冷冻保存，能使其保持新鲜肿瘤的组织学和基因学状态，与细胞株产生的小鼠模型相比, PDX模型能更好地反映原发病人的病理特性以及基因表达，因此可以更准确地预测临床疗效，是现阶段以及未来进行肿瘤研究和新药开发不可或缺的工具。

基于现有技术的结肠癌小鼠模型制备周期长、成功率低、模型不稳定等缺陷，本申请的发明人拟对小鼠结肠癌模型的制备方法进行改进，提供一种提高结肠癌PDX模型成功率的方法。

与本发明相关的现有技术有，

1.陈万青，张思维，曾红梅 等。中国2010年恶性肿瘤发病与死亡[J]. 中国肿瘤.2014,23(1):1-10.

2.Garber K. From human to mouse and back: ‘tumorgraft’ models surge inpopularity.J Natl Cancer Inst2009;101:6–8

3.Peterson JK, Houghton PJ. Integrating pharmacology and in vivo cancermodels in preclinical and clinical drug development.Eur J Cancer2004;40:837–844.

4.Linnebacher, M. et al.Cryopreservation of human colorectal carcinomasprior to xenografting. BMC Cancer 10, 362 (2010).

5.Cree IA, Glaysher S, Harvey AL. Efficacy of anti-cancer agents in celllines versus human primary tumour tissue. Curr Opin Pharmacol 2010;10:375–9.