[发明专利]利用非整倍玉米异源多倍体培育多年生饲草玉米的方法

权利要求书

1.利用非整倍玉米异源多倍体培育多年生饲草玉米的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)、当春季地温升至10℃以上时，对非整倍玉米异源多倍体(Tripsazea creammaize T.)进行分蔸繁殖，或将上一年茎秆扦插、压条、埋条或组织培养等无性繁殖方式获得的种苗，按株行距为2m×2m进行单株种植；同时，在其周围分批种植父本；

(2)、在吐丝前，将非整倍玉米异源多倍体雌穗套袋，并在授粉前将其花丝剪短至1～3cm，用父本花粉给非整倍玉米异源多倍体授粉；或者在隔离条件下，让父本给非整倍玉米异源多倍体自由授粉；待种子成熟后收获、晾干，保存于-20℃冰箱；

(3)、将步骤(2)所得的种子在太阳下翻晒3～4个小时，然后种植于人工气候室的营养钵中，在温度为25℃～30℃、湿度为60％～80％条件下进行催芽；待幼苗长至3叶1心时，取根尖，然后按照株行距为2m×2m在大田进行单株定植；在成株期，选择株高≥200cm、草长≥250cm、基部周长≥35cm、分蘖数≥20个、糖锤度≥10％、叶片表面无明显病斑、茎秆直立无倒伏、刈割单株鲜草产量≥20kg的植株；将中选的单株采用茎秆扦插方法扩繁成无性系；

(4)、对步骤(3)所选无性系的根尖进行染色体数鉴定，并利用原位杂交(GISH)和荧光原位杂交(FISH)对无性系的染色体构成进行鉴定，每个无性系鉴定30～50个细胞；选择染色体总数为60～72条，其中玉米染色体数为8～12条，摩擦禾染色体数为14～18条，四倍体多年生类玉米染色体数为38～42条的无性系；

(5)、将步骤(4)所选的无性系中越冬率≥100％的无性系进入品比试验；种苗为茎秆扦插苗或分蔸苗，以审定的多年生饲草玉米品种或其亲本为对照进行至少2年的品比试验；分别于抽雄始期刈割，选择鲜草产量高于对照品种15％，并且粗蛋白含量≥9.0％DM、相对饲用价值(RFV)≥80的品系，即为新的多年生饲草玉米。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于其步骤(1)或(2)中所述的非整倍玉米异源多倍体是指MTP94(Tripsazea creammaize T.2n＝94)或者MTP94的衍生系。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于其步骤(1)或(2)中所述的的父本是指玉米(Zea mays L.)、摩擦禾(Tripsacum L.)或大刍草(Teosinte)等材料之一种。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的玉米(Zea mays L.)是指玉米自交系、杂交种、综合种或农家品种等之一种。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的大刍草是指二倍体多年生大刍草(Z.diploperennis,2n＝20)、四倍体多年生类玉米(Z.perennis,2n＝40)、繁茂玉米种(Z.luxurians,2n＝20)、尼加拉瓜玉米种(Z.nicaraguensis,2n＝20)、墨西哥玉米亚种(ssp.mexicana,2n＝20)、韦韦特南戈亚种(ssp.huehuetenangensis,2n＝20)或小颖玉米亚种(ssp.parviglumis,2n＝20)等之一种。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述的四倍体多年生类玉米是四倍体多年生类玉米(Z.perennis,2n＝40)9475。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的摩擦禾(Tripsacum L.)是指鸭茅状摩擦禾(Tripsacum dactyloides,2n＝4x＝72)或其他摩擦禾属物种。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于其步骤(1)或(5)中所述的分蔸繁殖是指以植株基部的返青幼苗为定植苗进行无性繁殖的方法。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于其步骤(1)、(3)或(5)中所述的扦插繁殖是指以切断的茎节作为扦条进行无性繁殖的方法。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于其步骤(1)中所述的组织培养是指以根尖、茎端、茎节、叶、胚等具有细胞全能性的组织分生进行组织培养繁殖的方法。