[发明专利]一种用于鉴别杨梅雌雄的分子标记、引物对及其应用

权利要求书

1.一种用于鉴别杨梅雌雄的分子标记，为杨梅雌性特异的基因FT1，其核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，

所述分子标记在用于鉴别杨梅雌雄时的方法包括以下步骤：

（1）对待检测杨梅植株取样并提取基因组DNA；

（2）以所述基因组DNA为模板，利用引物对进行PCR扩增；

（3）PCR扩增产物进行电泳检测，

若电泳检测结果在470bp和268bp处均有特异性条带，则待检测杨梅植株为雌株；

若电泳检测结果只在268bp处有特异性条带，则待检测杨梅植株为雄株，

所述引物对，包括上游引物和下游引物，核苷酸序列为：

上游引物：5´-GTATCAAATCGATCTTTTC-3´；

下游引物：5´-ACAGCTACCTATTTTGGATT-3´。

2.引物对，包括上游引物和下游引物，其特征在于，核苷酸序列为：

上游引物：5´-GTATCAAATCGATCTTTTC-3´；

下游引物：5´-ACAGCTACCTATTTTGGATT-3´。

3.如权利要求2所述引物对在鉴别杨梅性别中的应用。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述杨梅为杨梅幼苗。

5.如权利要求2所述引物对在制备用于鉴别杨梅性别的试剂盒中的应用。

6.一种包含如权利要求2所述引物对的试剂盒。

7.如权利要求6所述试剂盒在鉴别杨梅性别中的应用。

8.一种鉴别杨梅性别的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）对待检测杨梅植株取样并提取基因组DNA；

（2）以所述基因组DNA为模板，利用权利要求2所述引物对进行PCR扩增；

（3）PCR扩增产物进行电泳检测，

若电泳检测结果在470bp和268bp处均有特异性条带，则待检测杨梅植株为雌株；

若电泳检测结果只在268bp处有特异性条带，则待检测杨梅植株为雄株。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系为：

2×SapphireAmp Fast PCR Master Mix 5 µL

10 µM上游引物 0.5µL

10 µM下游引物 0.5µL

30 ng/µL模板 1µL

ddH2O 3µL。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的条件为：

94℃预变性5 min；94℃变性30 s，53℃退火30 s，72℃延伸10 s，共35个循环；72℃延伸10 min。