[发明专利]一种特异性磁性Endoglin适配体成像探针系统的制备方法

权利要求书

1.一种特异性磁性Endoglin适配体成像探针系统的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、水热法制备磁性Fe₃O₄纳米粒子：称取2.502g七水硫酸亚铁，溶解于30mL的ddH₂O中，并加入浓度为50g/L的PEG-2000水溶液10mL，充分搅拌混匀，并逐滴加入30mL稀氨水，继续快速搅拌，并逐滴加入270μL H₂O₂溶液，至溶液呈现黑色后，继续搅拌20min，将溶液转移至高压反应釜中，于160℃下恒温反应6h后，磁分离洗涤3次，70℃烘干即得磁性Fe₃O₄纳米粒子；

b、磁性壳聚糖纳米颗粒Fe₃O₄@CMCS的制备：称取羧甲基壳聚糖CMCS 0.4g于20mL ddH₂O中，待搅拌完全溶解后过滤，滤液备用，在滤液中加入0.4g制备好的Fe₃O₄磁性纳米粒子，超声5min，得到分散均匀的Fe₃O₄磁性纳米粒子分散液，于250mL的三口瓶里加入58.2mL液体石蜡油，1.8mL span-80，然后边搅拌边加入中分散均匀的Fe₃O₄磁性纳米粒子分散液，混合液超声30min，使其分散均匀，充分搅拌反应2h，加入25％的戊二醛溶液2mL，继续搅拌反应1.5h，待反应完全后用石油醚磁分离洗涤3次，再用丙酮磁分离洗涤3次，所得产物于真空干燥箱70℃干燥，研磨得到磁性壳聚糖纳米颗粒Fe₃O₄@CMCS；

c、磁性Endoglin适配体成像探针mEND-Fe₃O₄@CMCS的制备：将磁性壳聚糖纳米颗粒Fe₃O₄@CMCS溶解于pH值为7.2的HEPES缓冲液中，加入40μLsulfo-SMCC，恒温摇床4℃孵育2h，用磁力架分离已交联SMCC的磁性颗粒，除去多余的交联剂后加入2-Endoglin适配体，修饰巯基到交联过的磁性粒子中，混匀，利用温度恒温摇床4℃孵育2h，加入100μL1％的牛血清蛋白封闭30min，用1mL偶联缓冲液洗涤纳米粒子2-3次，使用磁力架分离所得磁性颗粒，得到磁性Endoglin适配体成像探针mEND-Fe₃O₄@CMCS。

2.根据权利要求1所述一种特异性磁性Endoglin适配体成像探针系统的制备方法，其特征在于：所述探针mEND-Fe₃O₄@CMCS的平均粒径为85-90nm，表面电位为-31.9±0.5mV。