[发明专利]一种用于预防禽减蛋综合征的疫苗组合物、及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种疫苗组合物，该疫苗组合物包括免疫量的禽减蛋综合征病毒Fiber蛋白或免疫量的含有重组禽减蛋综合征病毒Fiber蛋白基因的活载体，以及兽医学上可接受的载体。该疫苗组合物可有效保护鸡群产蛋综合征的发生，且能针对不同地域的禽减蛋综合征病毒野毒株进行完全保护。

技术领域

本发明涉及一种用于预防禽减蛋综合征的疫苗组合物、及其制备方法和应用，属于生物医药领域。

背景技术

禽减蛋综合征病毒(Egg Drop Syndrome Virus,EDSV)属于禽腺病毒Ⅲ群，该病毒感染家禽后无明显临床症状，或可见轻微程度腹泻，常发生于产蛋高峰期禽，能够使蛋鸡产软壳、薄壳、无壳蛋，产蛋率严重下降，造成严重的经济损失。

EDSV具有典型的腺病毒形态，没有囊膜，具有红细胞凝集活性，在禽输卵管中增殖。病毒基因组为约33kb的线状双股DNA，病毒颗粒由结构蛋白构成，核衣壳直径70～80nm，呈二十面体对称，DNA被包于衣壳内。核衣壳由252个壳粒组成，其中240个是六邻体(Hexon蛋白)，构成二十面体的20个面以及棱的大部分。这些壳粒呈棱柱状，宽7nm，长11nm。另外12个是五邻体(Penton蛋白)，分别位于二十面体的12个顶角上。每个Penton蛋白有一条纤维突起(Fiber蛋白)。

禽减蛋综合征是当前世界范围内严重危害家禽养殖业发展的重要疾病之一。在各种防控措施中，疫苗免疫仍为最重要的措施。目前养禽业中普遍使用的EDS灭活疫苗是基于鸭胚增殖的病毒灭活后与矿物油佐剂乳化而成的疫苗。但是，由于禽减蛋综合征病毒在鸭胚上培养难以获得高滴度的病毒，导致制备的疫苗往往难以提供理想的免疫效果；此外，该病毒抗原的生产方式完全依赖于鸭种蛋，在禽流感等传染病发生时，鸭种蛋供应困难，严重影响禽减蛋综合征的防控。另外全病毒疫苗生产过程中还存在病毒灭活不完全造成的生物安全方面的风险。

亚单位疫苗是近几年发展起来的一种比较切实可行的新型基因工程疫苗，禽减蛋综合征亚单位疫苗研究以Hexon(240/252)为主要研究对象，然而一直以来，免疫效率低下，未开发成产品。现有技术中还没有制备出用于疫苗的免疫原性良好的蛋白。至今未有禽减蛋综合征亚单位疫苗上市。因此，临床上急需开发出免疫效果好的亚单位疫苗组合物，能够有效防止该病的流行，且能避免鸭种蛋供应波动的影响。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明提供一种禽减蛋综合征病毒免疫原性蛋白、及其制备的疫苗组合物及其制备方法以及应用，该疫苗组合物能够有效预防禽减蛋综合征病毒的感染。

本发明涉及一种用于预防禽减蛋综合征的疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包括免疫量的所述的禽减蛋综合征病毒抗原以及兽医学上可接受的载体；其中，所述禽减蛋综合征病毒抗原包括蛋白抗原或含有重组有所述禽减蛋综合征病毒免疫原性蛋白基因的活载体。

本发明还涉及一种制备所述疫苗组合物的方法，所述制备方法包括：步骤(1)克隆所述禽减蛋综合征病毒蛋白基因；步骤(2)转化重组所述步骤(1)中克隆的蛋白基因；步骤(3)表达所述重组的禽减蛋综合征病毒蛋白；步骤(4)分离纯化所述重组的禽减蛋综合征病毒蛋白，使用非离子表面活性剂处理所述纯化的重组的禽减蛋综合征病毒蛋白；步骤(5)将所述禽减蛋综合征病毒蛋白抗原与佐剂按比例混合，乳化。

本发明还涉及所述的疫苗组合物在制备预防和治疗禽减蛋综合征病毒感染的药物中的应用。

本发明首次采用禽减蛋综合征病毒Fiber蛋白，选取的禽减蛋综合征病毒蛋白基因高效表达后，制备疫苗组合物，可预防或治疗禽减蛋综合征疫情蔓延，并且含有该蛋白的疫苗组合物免疫动物后能使动物机体快速产生抗体，对当前流行的禽减蛋综合征病毒单独或混合感染有良好的预防和控制效果，生物安全性好。

本发明禽减蛋综合征病毒Fiber蛋白制备的疫苗组合物，其免疫原性好，能对鸡和鸭产生完全保护，能有效对多种地域来源的野毒株进行预防，也即在临床应用上能对禽减蛋综合征病毒的感染进行预防。