[发明专利]一种维药恰麻古多糖及其提取方法和应用

权利要求书

1.一种维药恰麻古多糖，其特征在于，所述恰麻古多糖BRNP-1和BRNP-2结构式分别如下：

。

2.如权利要求1所述的一种维药恰麻古多糖提取方法，其特征在于，所述恰麻古多糖提取包括下列步骤：

(1)取恰麻古干燥药材，加入3倍量体积的石油醚，60℃连续回流脱脂2h，药渣过滤后，晾干备用，滤液回收；

(2)取脱脂后的恰麻古药材，加入30倍质量的水，90℃-100℃连续回流提取3次，每次2h，合并三次提取液，过滤后，滤液浓缩至总量的20％，加入无水乙醇至浓缩滤液的体积分数浓度为80％，放至4℃过夜；

(3)抽滤步骤(2)过夜溶液后收集沉淀，加入10-30倍质量的蒸馏水重新溶解，室温下充分搅拌，使其溶解完全，将样品溶液装入7000Da-8000Da分子量的透析袋，用蒸馏水透析后，收集袋内溶液，浓缩冻干后，得到恰麻古粗多糖；

(4)按质量份数计，取恰麻古粗多糖3份，用0.01份-0.1份蒸馏水充分溶解后，4000r·min^-1，15min离心除去不溶于水的杂质，沉淀收集保存；

(5)另将上清液，上样至已装填平衡完全的阴离子交换柱，分别用H₂O、0.5mol/L NaCl、1.0mol/L NaCl、2.0mol/L NaCl和0.2mol/L NaOH洗脱，硫酸苯酚法检测，分段收集含糖部分的洗脱液，得到BRN、BRA1、BRA2、BRA3、BRA45个组分；

(6)分别将5个组分浓缩，冷冻干燥，按质量份数计，取BRN 300份-500份，加入0.01倍-0.1倍纯水，室温下充分溶解，4500r·min^-1，20min离心2次，取上清液，上样至已装填平衡完全的凝胶色谱柱，用0.1mol/LNaCl洗脱，按每管15mL收集洗脱液，硫酸苯酚法检测，收集至无糖检出；

(7)按照洗脱曲线合并、浓缩、透析、冷冻干燥得到BRN-1和BRN-2；

(8)按质量份数计，分别取BRN-1和BRN-2150份，加入0.05倍-0.1倍纯水，4500r·min^-1，20min离心2次，取上清液，上样至已装填平衡完全的凝胶色谱柱，用0.1mol/LNaCl洗脱，按每管10mL收集洗脱液，硫酸苯酚法检测，收集至无糖检出，BRN-1得到两个部分，分别为BRN-1a和BRN-1b；BRN-2得到两个组分，分别为BRN-2a和BRN-2b，取BRN-1a和BRN-2b浓缩后，冷冻干燥，分别标号为BRNP-1和BRNP-2，称重，分别置于干燥器中保存，备用。

3.如权利要求2所述的一种维药恰麻古多糖提取方法，其特征在于，所述步骤(2)用90℃水连续回流提取3次。

4.如权利要求2所述的一种维药恰麻古多糖提取方法，其特征在于，所述步骤(3)用7000Da分子量的透析袋。

5.如权利要求2所述的一种维药恰麻古多糖提取方法，所述步骤(6)取BRN500份，加入0.03倍纯水，室温下充分溶解，4500r·min^-1，20min离心2次，取上清液。

6.如权利要求2所述的一种维药恰麻古多糖提取方法，其特征在于，所述提取方法提取的多糖BRNP-1和BRNP-2的总糖含量为100％。

7.如权利要求1所述的一种维药恰麻古多糖在制备提高免疫力药物中的应用。

8.如权利要求7所述的一种维药恰麻古多糖在制备提高免疫力药物中的应用，其特征在于，BRNP-1给药浓度为400μg·mL^-1。

9.如权利要求8所述的一种维药恰麻古多糖在制备提高免疫力药物中的应用，其特征在于，BRNP-2给药浓度为400μg·mL^-1。