[发明专利]基于高浓度盐溶液下金纳米的聚沉构建的化学生物传感器、制备方法及应用

权利要求书

1.基于高浓度盐溶液下金纳米的聚沉构建的化学生物传感器的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

1)、将抗生素蛋白avidin溶液和biotin-ssDNA溶液混合在PBS缓冲液中，培养，使avidin与biotin-ssDNA结合，对DNA单链起保护作用；

2)将Exo I剪切酶加入步骤1)培养后的溶液中，加热反应，然后冷却至室温；

3)室温下，将AuNPs加入步骤2)得到的冷却后的反应液中反应，最后加入NaCl溶液，利用AuNPs在高盐浓度下发生聚沉而使溶液颜色变化，制备得到化学生物传感器；

步骤1)中biotin-ssDNA序列为

5-CCCTCTATCTATCTCTCTCTCTCTCACTTA-biotin-3。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤1)中所述培养具体为：在30～37℃下反应20-30min。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤1)具体为：将30μL 1μM的抗生素蛋白avidin溶液和30μL 2μM biotin-ssDNA溶液混合在40μL PBS缓冲液中，在30～37℃下反应20-30min。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤2)中所述加热反应具体为：先在30～37℃下反应20min后，再85～95℃热水浴20-30min。

5.根据权利要求1或4所述的制备方法，其特征在于：步骤2)具体为：将10U Exo I剪切酶加入步骤1)培养后的溶液中，在37℃下反应20min后，85℃热水浴，热水浴20min后拿出冷却至室温。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤3)具体为：将200μL AuNPs加入步骤2)得到的冷却后的反应液中反应10min，最后加入120μL 0.2M的NaCl溶液，利用AuNPs在高盐浓度下发生聚沉而使溶液颜色变化，制备得到化学生物传感器。

7.基于高浓度盐溶液下金纳米的聚沉构建的化学生物传感器，其特征在于，采用权利要求1-6任一项所述的方法制备得到。

8.权利要求1-6任一项所述方法制备的基于高浓度盐溶液下金纳米的聚沉构建的化学生物传感器用于检测抗生素蛋白avidin的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，具体检测方法为：将biotin标记在DNA单链上并和avidin结合构建末端保护体系对DNA单链起保护作用，保护DNA不被Exo I剪切酶水解，由于单链DNA和AuNPs之间的相互作用，使得AuNPs在高盐浓度下不发生聚沉，不同浓度的avidin溶液，体系颜色不同，吸光度不同，实现对不同浓度的avidin定量检测。