[发明专利]具有CD3E和/或HER2靶向功能的双特异性抗体及其用途

说明书

本申请提供了新型双特异性抗体，其包含针对人CD3E的抗原结合部和/或针对HER2的抗原结合部。此外，本申请还提供了所述新型双特异性抗体的医学和生物学用途。

技术领域

本申请大体涉及抗体药物领域，具体而言，本申请提供了新型双特 异性抗体及其医学和生物学用途。

背景技术

双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)是一类人工抗体，其包含 两个不同的抗原结合位点。双特异性抗体在生物医药领域，尤其是肿瘤 免疫治疗方面应用广泛。

双特异性抗体从作用机制上可分为双重信号阻断型和介导细胞功能 型。通常，介导细胞功能型双特异性抗体指介导T细胞杀伤的抗CD3双特 异性抗体。1985年，利用T细胞杀死肿瘤细胞的概念就已被提出(Stearz at al.Nature 1985,314:628-631)。通常认为有效激活T细胞需要双重信号， 第一信号来自抗原呈递细胞上MHC-抗原复合物与T细胞受体TCR-CD3 的结合，第二信号为T细胞与抗原呈递细胞表达的共刺激分子相互作用后 产生的非抗原特异性共刺激信号。由于多数癌细胞表面MHC的表达下调 甚至缺失，从而使癌细胞逃逸免疫杀伤。靶向CD3的双特异性抗体则能 够分别结合T细胞表面CD3分子和癌细胞表面抗原，从而拉近细胞毒性T 细胞(cytotoxic T cell，Tc或CTL)与癌细胞的距离，引导T细胞直接杀伤 癌细胞，而不再依赖于T细胞的双重激活信号。双特异性抗体可以是三功 能抗体，即一条臂靶向肿瘤细胞上的抗原，另一条臂靶向T细胞的CD3分 子，Fc段结合Fc受体。这种抗体使得T细胞、肿瘤细胞和结合抗体Fc结构 域的效应细胞形成复合体(Muller andKontermann,BioDrugs 2010；24:89-98)。

CD3分子有δ、ε、γ、ζ共4个亚基，分子量分别为18.9kDa、23.1kDa、 20.5kDa、18.7kDa，各包括171个、207个、182个和164个氨基酸残基。四 种亚基组成的6条多肽链与T细胞受体(T cell receptor，TCR)紧密结合， 形成包含8条多肽链的TCR-CD3复合物，该复合物传导T细胞激活信号， 稳定TCR结构。CD3的胞内部分含有免疫受体酪氨酸激活基序(immunoreceptor tyrosine-based activation motif，ITAM)，TCR识别和结合 MHC分子呈递的抗原肽，使得T细胞内的酪氨酸蛋白激酶p561ck磷酸化 CD3分子中ITAM的酪氨酸残基，之后募集含有SH2(Scrhomology 2)结 构域的酪氨酸蛋白激酶(如ZAP-70)。ITAM磷酸化和结合ZAP-70是T细 胞激活早期信号传导过程的重要生化反应之一。因此，CD3分子有传导TCR识别抗原产生的激活信号的功能。

抗CD3E抗体能结合T细胞表面TCR受体复合物中的CD3E亚基，能够 提供T细胞激活的第一信号(类似于抗原递呈细胞上的MHC-肽复合物结 合到TCR)，有利于T细胞的激活。而且包含针对CD3E的的抗原结合部的 双特异性抗体，可以实现T细胞在肿瘤细胞周边的富集，提高T细胞对肿 瘤细胞的杀伤效率。

由于早期在免疫原性、结构稳定性以及抗体质量控制等方面的不足， 限制了双特异性抗体的进一步发展。近年来，上游基因工程抗体和下游 生产工艺技术的改进，克服了传统双特异性抗体的缺陷，从而推动了多 类新型双特异性抗体进入临床开发阶段。为了解决将两个不同的半抗体 进行正确装配的问题，设计开发了多种结构的双特异性抗体。