[发明专利]一种同时提取罗汉果甜苷V、Ⅵ和11-O基苷V的方法

说明书

一种同时提取罗汉果甜苷V、Ⅵ和11‑O基苷V的方法，包括以下步骤：（1）将罗汉果甜苷V精制母液溶解，正丁醇萃取，得正丁醇层；（2）浓缩，冷却，析晶，过滤，得晶体和析晶母液，晶体干燥，得罗汉果甜苷Ⅵ；（3）将析晶母液浓缩至无醇，溶解，过聚酰胺层析柱，收集流出液，浓缩，干燥，得罗汉果甜苷V；（4）先后用低度醇和高度醇对层析柱洗脱，收集高度醇洗脱液，浓缩，冷却，析晶，过滤，干燥，得罗汉果11‑O基苷V。本发明方法所得罗汉果甜苷Ⅵ的纯度≥97%，收率≥83%，罗汉果甜苷V的纯度≥89%，收率≥89%，11‑O基苷V的纯度≥96%，收率≥85%；本发明方法条件温和，安全环保，适于工业化生产。

技术领域

本发明涉及一种提取罗汉果甜苷的方法，具体涉及一种同时提取罗汉果甜苷V、Ⅵ和11-O基苷V的方法。

背景技术

罗汉果是我国传统的药食同源植物，罗汉果甜苷是其主要的功能成分，是一类高甜度、低卡路里的理想天然甜味剂，因其具有多种生物活性而备受人们的关注。罗汉果甜苷分为多种，研究表明罗汉果甜苷是一种三萜烯葡萄糖苷，其配糖苷元是三萜烯醇，有两条由四个以下葡萄糖单位组成的葡萄糖苷侧链，以β-糖苷键与苷元相连，侧链葡糖糖之间的连接键为β-1,6和β-1,2糖苷键。其中，罗汉果甜苷V的含量最高，其次是11-O基苷V和苷Ⅵ，三种甜苷的分子式如下：

罗汉果甜苷V

罗汉果11-O基苷V 罗汉果甜苷Ⅵ

罗汉果甜苷的提取在国内已有多年的产业化经验，对于罗汉果甜苷V的分离和提纯的研究比较广泛。

CN101029071A公开了一种从罗汉果中制备高纯度罗汉果苷V的方法，是以罗汉果鲜果为原料，通过乙醇回流提取，乙酸乙酯和正丁醇萃取，聚酰胺和硅胶层析，得到罗汉果苷V。但是，该方法过于复杂，生产成本极高，且只能获得罗汉果苷V一种成分。

CN106074669A公开了一种罗汉果多酚的提取方法，是以罗汉果果皮为原料，通过干燥，粉碎，乙醇超声提取，聚酰胺吸附，洗脱，浓缩等步骤得到罗汉果多酚提取物。但是，该方法未涉及罗汉果甜苷的分离方法。

CN1375499A公开了一种从罗汉果中提取分离多种成份的方法，是以罗汉果为原料，通过碱水提取，脂肪醇沉淀，离子交换树脂、大孔树脂、聚酰胺树脂等处理，得到罗汉果甜苷、罗汉果多糖和罗汉果黄酮。但是，该方法获得的罗汉果甜苷为多种甜苷的混合物，并未得到各甜苷的高纯产品。

CN101851265A公开了一种从干罗汉果中提取多种活性成分的方法，是先将干罗汉果去核，再通过加水闪提，离心，多次聚酰胺层析，D213脱色，醇沉，酶解等步骤，分别得到甜苷、多酚、多糖、低聚糖和氨基酸等成分。但是，该方法获得的罗汉果甜苷同样是多种甜苷的混合物，并未得到各甜苷的高纯产品。

由上可知，现有关于罗汉果11-O基苷V和苷Ⅵ分离和提纯的报道很少。实际生产中得到的罗汉果提取物通常是罗汉果总苷的混合物，因此，迫切需要找到一种方法，实现单一成分的分离，并实现产业化。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种所得产品纯度、收率高，成本低，工艺条件温和，安全环保，适于工业化生产的同时提取罗汉果甜苷V、Ⅵ和11-O基苷V的方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种同时提取罗汉果甜苷V、Ⅵ和11-O基苷V的方法，包括以下步骤：

（1）正丁醇萃取：将罗汉果甜苷V精制母液用水溶解，加入正丁醇进行萃取，分离水层，得正丁醇层；

（2）浓缩析晶：将步骤（1）所得正丁醇层减压浓缩，冷却，搅拌析晶，过滤，得晶体和正丁醇析晶母液，将晶体干燥，得罗汉果甜苷Ⅵ；