[发明专利]一种经由细胞片层获得的导电细胞外基质复合薄膜及其制备方法

权利要求书

1.一种经由细胞片层获得导电细胞外基质复合薄膜的方法，其特征在于，制备方法包括如下步骤：

(a). 对涂有TiO₂纳米点薄膜的表面以紫外光照或蒸气消毒方式消毒；

(b). 将上述经处理后的表面作为体外细胞培养表面，在其表面以5×10⁴~2×10⁶个/cm²的密度种植细胞，加入细胞培养基，并放入37℃恒温及5%二氧化碳的细胞培养箱中培养7~15天；1~3天换液一次，在细胞脱附前1~5天加入1~100 μg/mL纳米导电物质，最终在细胞培养表面上形成完整的细胞片层；

(c). 将经上述培养后的培养表面移入PBS中，通过波长为365 nm的紫外光光照5~30min，使培养后的细胞或细胞薄层脱附，用PBS缓冲液以及去离子水对脱附后的细胞片层反复清洗；

(d). 将细胞片层浸泡于去离子水中，置于-80℃冷冻30~60 min，取出后在25~37℃解冻20~45 min，冷冻-解冻循环重复3~10次，之后用去离子水清洗，获得导电细胞外基质复合薄膜。

2.根据权利要求1所述的经由细胞片层获得导电细胞外基质复合薄膜的方法，其特征在于，所述的纳米导电物质为石墨烯纳米片、石墨烯纳米点、纳米碳纤维、单壁碳纳米管、多壁碳纳米管、纳米碳颗粒、碳量子点、纳米金颗粒、纳米银颗粒中的一种或多种。

3. 根据权利要求2所述的经由细胞片层获得导电细胞外基质复合薄膜的方法，其特征在于，所述的石墨烯纳米片尺寸为0.5~2 μm，厚度为0.8~2 nm；石墨烯纳米点的尺寸为5~10nm；纳米碳纤维的直径为50~200 nm；单壁碳纳米管的直径为1~2 nm，长度1~3μm；多壁碳纳米管的直径为1~50 nm, 长度0.5~2μm；碳量子点的尺寸为3~5 nm；纳米金颗粒的直径为10~50 nm；纳米银颗粒的直径为10~100 nm。

4.一种导电细胞外基质复合薄膜，其特征在于，采用如权利要求1所述的方法制备而成，厚度为3~10μm。