[发明专利]用于蓝莓组织培养的初代、继代培养基

说明书

本发明公开了一种用于蓝莓组织培养的初代、继代培养基。本发明提供了一种较传统组培育苗技术相比价格更加低廉、培养基成本大幅降低的蓝莓腋芽高效繁殖技术新体系，其目的是提供一套廉价高效的蓝莓腋芽繁殖体系。本发明利用以其他类型的细胞分裂素代替目前生产上常用的玉米素(ZT)进行蓝莓初代和继代培养，可降低68.7％的初代培养基成本，降低79.1％的继代培养基成本，但繁殖效率同ZT相比没有明显差异。克服了由于玉米素(ZT)激素价格昂贵对蓝莓组培苗生产的限制，极大地降低了生产成本。本发明既可大大降低生产成本，也可进一步提高初代和继代生长效果，提高增殖效率，具有较大的实际应用价值。

技术领域

本发明属于植物组织培养领域，涉及一种用于蓝莓组织培养的初代、继代培养基，特别涉及一种利用廉价高效的细胞分裂素代替玉米素(ZT)从而降低成本的蓝莓腋芽繁殖新体系。

背景技术

蓝莓具有极高的经济价值和保健功能，具有低脂肪、强抗氧化性等特点。目前，随着引种规模扩大，优良种苗需求量急剧增加，种苗生产供不应求。而组织培养凭借其无性繁殖的独特优势，可以迅速更新品种，且可在较小空间和较短时间内快速地获得大量无性系组培苗，成为蓝莓快速繁殖的主要途径。

在蓝莓组培生产中，激素是材料成本的主要部分。玉米素(ZT)是一种天然细胞分裂素，结合生长素使用可以促进愈伤组织分化，苗木再生及扩繁，广泛应用于蓝莓等多种果树的组培育苗生产中。但玉米素(ZT)价格高昂，约为4.5045万元/g，大大增加了蓝莓组培苗生产成本。

因此，急需一种相对价格更加低廉、高效的蓝莓腋芽繁殖技术体系，可大幅降低培养基成本。2-异戊烯基腺嘌呤(2-iP)是另一种常见的细胞分裂素，可以促进愈伤组织分化；2-iP价格低廉，约967.6元/g。若在组培生产上能取代ZT，会大大降低成本。

发明内容

本发明的目的是提供一种更加低廉、高效的用于蓝莓组织培养的初代、继代培养基。

本发明提供的用于蓝莓组织培养的培养基，包括初代培养基和继代培养基；所述初代培养基是在WPM固体培养基中加入2-iP后得到的培养基；所述初代培养基中2-iP的终浓度为0.5-4.0mg/L(如1.0-2.0mg/L)；所述继代培养基是在WPM固体培养基中加入2-iP、IBA和NAA后得到的培养基；所述继代培养基中2-iP的终浓度为2.0-7.0mg/L(如2.0-5.0mg/L或者5.0-7.0mg/L)、IBA的终浓度为0.2mg/L、NAA的终浓度为0.08mg/L。

其中，单独的所述初代培养基和单独的所述继代培养基都是本发明的保护范围。

在本发明的一个实例中，所述初代培养基中2-iP的终浓度具体为2.0mg/L。所述继代培养基中2-iP的终浓度具体为5.0mg/L、IBA的终浓度具体为0.2mg/L、NAA的终浓度具体为0.08mg/L。该培养基更加适用于Bluejay品种蓝莓或者其他具有同等组培性状的蓝莓品种。

在本发明的另一个实例中，所述初代培养基中2-iP的终浓度具体为1.0mg/L。所述继代培养基中2-iP的终浓度具体为7.0mg/L、IBA的终浓度具体为0.2mg/L、NAA的终浓度具体为0.08mg/L。该培养基更加适用于Brigittblue品种蓝莓或者其他具有同等组培性状的蓝莓品种。

在本发明中，所述WPM固体培养基中的碳源具体为蔗糖；所述WPM固体培养基中的凝胶剂具体为琼脂。

更加具体的，所述蔗糖在所述WPM固体培养基中的终浓度为30g/L；所述琼脂在所述WPM固体培养基中的终浓度为6.4g/L。

以上所述的各种培养基的pH均为5.2-5.3。

以上所述的各种培养基在以茎段为外植体进行蓝莓组织培养中的应用当然也属于本发明的保护范围。