[发明专利]一种ASE‑HPLC法测定人参中多种人参皂苷的方法

说明书

技术领域

本发明涉及人参中人参皂苷的检测领域，尤其是一种ASE-HPLC法测定人参中多种人参皂苷的方法。

背景技术

人参是我国地道药材中应用最广泛的代表，人参皂苷是人参的主要药效成分，人参皂苷具有增强记忆力，提高免疫力，改善心血管，调节内分泌，延缓衰老和抗肿瘤等功能，人参皂苷的含量测定已经成为国内外研究的热点。

随着社会的发展，对于药品质量控制的要求也越来越高，但由于人参化学成分复杂，人参皂苷种类多样，现已确定并分离的人参皂苷化合物单体有50余种，根据苷元的不同，人参皂苷被分为原人参二醇类皂苷、原人参三醇类皂苷及齐墩果酸类皂苷。

因此建立同时、多种、快捷、方便、可靠的人参皂苷检测方法对人参及其制剂的质量控制具有重要意义。

发明内容

针对上述不足，本发明旨在提供一种可同时测定多种人参皂苷单体、线性范围广、方法准确、重现性好、快捷简便、稳定可靠的ASE-HPLC法测定人参中人参皂苷的方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供的技术方案是这样的：一种ASE-HPLC法测定人参中的多种人参皂苷的方法，依次包括下述步骤：

步骤1：采用ASE萃取方法萃取粉碎过的人参样品；其中，ASE萃取方法包括先在索氏提取器中采用三氯甲烷萃取，然后在快速溶剂萃取仪中用甲醇萃取，收集甲醇萃取液；

步骤2：采用HPLC法检测甲醇萃取液中的人参皂苷的含量。

进一步的，所述的步骤1包括下述子步骤：

步骤S1：将样品粉碎，过四号筛，取过筛后的粉末1g；

步骤S2：装于索氏提取器中，加入三氯甲烷，加热回流4小时，三氯甲烷萃取液舍弃；

步骤S3：将1g硅藻土和药渣混合，移入放有纤维滤膜的ASE 10ml萃取池中，加硅藻土至与池口平行；

步骤S4：放入快速萃取仪中进行萃取，萃取溶剂为甲醇；

步骤S5：将萃取液蒸干，残渣加甲醇溶解，并加甲醇定容至10ml，取1ml加至装有100mgPSA的2ml离心管中，离心，滤过，即得甲醇萃取液。

进一步的，所述的步骤S4中，萃取参数为：萃取温度为110℃，萃取时间为10min，萃取次数为1次，冲洗体积为60％，吹扫时间为60s。

进一步的，所述的ASE萃取方法采用美国DIONEX公司的ASE350快速溶剂萃取仪。

进一步的，所述的步骤2中，HPLC法的检测参数为：色谱柱：Thermo Syncronis Dim.AQ；柱温：50℃；流速：0.3mL/min；流动相：乙腈-水；检测波长：203nm。

进一步的，所述的流动相：乙腈-水的体积比为18～32：68～82；

第0分钟，流动相中乙腈-水的体积比为18：82；

第10分钟，流动相中乙腈-水的体积比为20：80；

第18分钟，流动相中乙腈-水的体积比为30：70；

第24分钟，流动相中乙腈-水的体积比为32：68；

第25-28分钟，流动相中乙腈-水的体积比为18：82。

进一步的，所述的色谱柱的规格为1.7μm，50×2.1mm；所述的HPLC检测方法所采用Thermo U3000 UHPLC液相色谱仪。

本发明与传统方法相比，具有以下优点：

1.本发明提供一种同时测定3种人参皂苷单体HPLC方法，所测定的3种人参皂苷单体为Rg1、Re、Rb1，提高了效率；

2.本发明只用乙腈和水作流动相，解决了磷酸盐对色谱柱损耗大,系统清洗麻烦等问题，流动相配制方便，简便了操作；

3.本发明所测定的结果表明，3种人参皂苷单体在0.5～3.0μl范围内均呈良好的线性关系、线性范围广，方法准确、重现性好、快捷简便、稳定可靠。

4.本发明能更好地分析人参皂苷单体的含量，为人参及其制剂的质量控制提供理论依据。

附图说明

图1为人参皂苷Rg1以浓度(mg)-峰面积进行的线性回归图；

图2为人参皂苷Re以浓度(mg)-峰面积进行的线性回归图；

图3为人参皂苷Rb1以浓度(mg)-峰面积进行的线性回归图；

图4为人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1的对照品图谱图；

图5为快速溶剂萃取样品的图谱图；

图6为药典方法提取样品的图谱图。

具体实施方式