[发明专利]一种利用重组微生物发酵生产1,3‑丙二醇的方法在审
| 申请号: | 201710194075.1 | 申请日: | 2017-03-28 |
| 公开(公告)号: | CN106906248A | 公开(公告)日: | 2017-06-30 |
| 发明(设计)人: | 陈振;刘德华 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
| 主分类号: | C12P7/18 | 分类号: | C12P7/18;C12R1/15;C12R1/19;C12R1/125;C12R1/865 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司11002 | 代理人: | 王文君 |
| 地址: | 100084 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 利用 重组 微生物 发酵 生产 丙二醇 方法 | ||
1.一种利用重组微生物发酵生产1,3-丙二醇的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)构建能够过表达磷酸二羟基丙酮磷酸酯酶、甘油脱氢酶、甘油脱水酶及其激活因子、醇脱氢酶的重组微生物;
(2)以含可发酵糖的原料为底物进行好氧发酵。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述重组微生物的构建方法为:1)构建分别能够过表达磷酸二羟基丙酮磷酸酯酶和甘油脱氢酶的重组菌或重组质粒;2)构建分别能够过表达甘油脱水酶及其激活因子和醇脱氢酶的重组菌或重组质粒;3)将步骤1)获得的重组质粒电转化入步骤2)获得的重组菌中,或将步骤2)获得的重组质粒电转化入步骤1)获得的重组菌中,筛选获得能够过表达磷酸二羟基丙酮磷酸酯酶、甘油脱氢酶、甘油脱水酶及其激活因子、醇脱氢酶的重组微生物。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述的微生物为谷氨酸棒杆菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母。
4.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述磷酸二羟基丙酮磷酸酯酶来源于谷氨酸棒杆菌,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述甘油脱氢酶来源于大肠杆菌,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
5.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述甘油脱水酶及其激活因子,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
6.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述醇脱氢酶来自大肠杆菌或肺炎克雷伯菌。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述含可发酵糖的原料为糖蜜,蔗糖、葡萄糖、淀粉水解液、玉米浆、木糖、甘露糖或甘油。
8.如权利要求1-7任一所述的方法,其特征在于,步骤(2)的发酵条件为,28-35℃,pH值5-8,溶氧值10%。
9.如权利要求1-7任一所述的方法,其特征在于,还包括发酵过程中流加碳源,以及发酵培养基中含有硫胺素和维生素B12。
10.权利要求1-9任一所述的方法在提高1,3-丙二醇产量中的应用。
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