[发明专利]一种河川沙塘鳢生长性状相关基因的SNP分子标记及其扩增引物与应用有效
申请号: | 201710190606.X | 申请日: | 2017-03-28 |
公开(公告)号: | CN106834521B | 公开(公告)日: | 2020-09-08 |
发明(设计)人: | 尹绍武;张宏叶;李泽成;张佳佳;赵诚;谢万里 | 申请(专利权)人: | 南京师范大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 楼高潮 |
地址: | 210097 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 河川 沙塘鳢 生长 性状 相关 基因 snp 分子 标记 及其 扩增 引物 应用 | ||
本发明公开了一种河川沙塘鳢生长性状相关基因的SNP分子标记及其扩增引物与应用。所述SNP分子标记来自IGF‑1R基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1上第1392位碱基为A或G,所述引物为SEQ ID NO:2‑3。通过对河川沙塘鳢基因组DNA提取,PCR扩增,扩增产物测序,以及基于测序结果确定所述待测河川沙塘鳢的SNP位点位于IGF‑1R基因外显子区域的基因型,利用SPSS 19.0软件进行数据处理,GLM程序分析碱基变异信息为SNPg.1392 AG与河川沙塘鳢的生长性状显著相关。本发明实现短时间、低成本、高准确性地选育河川沙塘鳢优良品种。
技术领域
本发明属于水产生物技术领域,涉及一种河川沙塘鳢生长性状相关基因的SNP分子标记及其扩增引物与应用。
背景技术
河川沙塘鳢(Odontobutis potamophila)属鲈形目(Perciformes),沙塘鳢科(Odontobutidae),沙塘鳢属(Odontobutis),俗称:虎头鲨、虎头呆子等。在我国广泛分布于长江中下游、钱塘江、闽江等水系,属中国特有种。该鱼肉质鲜美细嫩,市场价格坚挺,已成为一种具有较高经济价值的水产养殖品种。目前全国已零星开展了河川沙塘鳢的混养和套养,但产量还远不能满足市场的消费需求。在生产的过程中苗种出现生长速度慢、抗病能力弱、病害增加等种质退化现象。良种问题已成为制约河川沙塘鳢养殖业稳定发展的主要“瓶颈”之一。因此,培育出具有生长快、产量高等优良生长性状的河川沙塘鳢新品种,是保障其养殖业可持续发展的必要条件。
伴随着分子生物学的发展,单核苷酸多态性(SNP)作为新一代分子标记已经在育种领域得到认可,目前在鱼类中,关于生长、抗病等相关的SNP分子标记有较多报道,而这些SNP位点较少应用在分子标记的辅助育种,对应到生长相关基因(如IGF-1R)联合SNP位点进行分子辅助育种应用的报道更少。IGF-1R基因是生长轴上的关键基因,与IGF-1结合能引起酪氨酸残基自身磷酸化,有激活细胞内信号传导通路(MAPK和P13K-KT通路),调控生物生长发育,控制细胞凋亡、增殖、分化等功能。对于IGF-1R的研究主要集中在序列、结构分析、表达和分子系统等方面,而有关在河川沙塘鳢与生长性状相关IGF-1R基因的SNPs研究至今尚未见报道。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种河川沙塘鳢生长性状相关基因的SNP分子标记及其扩增引物与应用,基于本发明SNP引物,通过SPSS 19.0GLM程序,对IGF-1R基因中SNP与河川沙塘鳢生长性状进行关联分析,获得了一个与生长性状相关的SNP,所述SNP引物可用于识别河川沙塘鳢的所属生长性状,实现短时间、低成本、高准确性地选育河川沙塘鳢优良品种。
为解决现有技术问题,本发明采取的技术方案为:
一种河川沙塘鳢生长性状相关基因的SNP分子标记,所述SNP分子标记来自IGF-1R基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其中第1392位碱基为A或G;
其中SNP分子标记引物的上游引物如SEQ ID NO:2所示,
序列为5’-CACTCTGAGTTCCCTGGCTTTC-3’;
下游引物如SEQ ID NO:3所示,序列为5’-AAACCGAGGAGGAAAGGAGTG-3’。
上述SNP分子标记在选育河川沙塘鳢优良品种上的应用,通过对河川沙塘鳢基因组DNA提取,PCR扩增,扩增产物测序,以及基于测序结果确定所述待测河川沙塘鳢的SNP位点位于IGF-1R基因外显子区域的基因型,利用SPSS 19.0软件进行数据处理,GLM程序分析碱基变异信息为SNPg.1392GA与河川沙塘鳢的全长、体长、体高、尾柄长、体重、体宽重要生长性状显著相关;所述待测河川沙塘鳢的SNP位点位于IGF-1R基因外显子区域的基因型为AG时,个体的生长性状均高于GG基因型的个体;所述个体的生长性状为河川沙塘鳢的全长、体长、体高、尾柄长、体重、体宽。
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