[发明专利]一种免疫印迹薄膜及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于蛋白质分析领域，更具体地，涉及一种免疫印迹薄膜及其制备方法与应用。

背景技术

免疫印迹(Western Blot)技术是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白，并能对蛋白进行定性和半定量分析。结合化学发光检测，可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。由于免疫印迹具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性，现已成为蛋白分析的一种常规技术。

免疫印迹技术所用的薄膜为硝酸纤维素膜、尼龙膜或聚偏氟乙烯膜，形状为条状(《抗体技术实验指南》，科学出版社，2002.9)。该薄膜仅能进行单个待测样本的单次检测，若需进行多个待测样本的平行检测，则需将该多个蛋白样本转移到不同的薄膜上后，针对不同的薄膜单独进行孵育，同时进行振荡以加快反应速度。因此使用该薄膜具有以下缺点：一、在进行平行检测时，反应效率低下；二、由于免疫印迹薄膜需要浸泡在待测样本溶液中，所需的样本量大，耗费试剂，且难以进行痕量检测；三、薄膜需要进行干燥后显色拍照，再进行分析，从而无法实现原位检测；四、由于薄膜通常浸泡在不同窗口或反应槽中，不同薄膜的反应条件略有差异，从而影响免疫印迹的准确性。以上缺点也间接导致了应用该薄膜进行免疫印迹的自动检测仪器的结构较为复杂，生产成本较高。

发明内容

针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本发明提供了一种免疫印迹薄膜及其制备方法，其目的在于将薄膜表面划分为多个亲水区域，从而实现多个蛋白样本的平行检测。

为实现上述目的，按照本发明的一个方面，提供了一种免疫印迹薄膜，所述免疫印迹薄膜表面具有以疏水区域间隔的多个平行的条状亲水区域，所述条状亲水区域具有一个或多个结合区，所述结合区上具有目标抗原，用于结合免疫印迹的目标抗体。

优选地，所述条状亲水区域具有多个结合区，所述多个结合区包括实验区以及对照区。

作为进一步优选地，所述对照区包括阳性对照区、阴性对照区或结合物对照区。

优选地，所述条状亲水区域的材料为硝酸纤维素、尼龙或聚偏氟乙烯。

优选地，所述疏水区域具有硅烷基。

作为进一步优选地，所述疏水区域的材料为聚二甲基硅氧烷或其衍生物。

优选地，所述条状亲水区域以及疏水区域的宽度为1mm～5mm。

优选地，所述免疫印迹薄膜沿条状亲水区域的方向绕制为卷轴结构。

作为进一步优选地，所述卷轴结构的直径为2cm～6cm。

作为进一步优选地，所述卷轴结构绕制于支撑轴上。

作为更进一步优选地，所述支撑轴为圆柱状或圆筒状。

按照本发明的另一方面，还提供了一种上述免疫印迹薄膜的制备方法，包括：

在衬底膜上结合目标抗原，以形成与目标抗原的数量相同的结合带，所述衬底膜的材料为硝酸纤维素、尼龙或聚偏氟乙烯；

用疏水涂料在衬底膜上形成疏水区域，以将衬底膜分隔为多个条状亲水区域，同时将结合带分隔为结合区，使得每个条状亲水区域都具有与目标抗原的数量相同的结合区。

按照本发明的另一方面，还提供了一种上述免疫印迹薄膜的制备方法，包括：

将多个条状亲水薄膜平行贴制于疏水薄膜上，使得所述疏水薄膜上具有与多个条状亲水薄膜形成的多个平行的条状亲水区域，所述条状亲水区域以疏水区域相间隔。

优选地，所述疏水薄膜表面具有与条状亲水薄膜相配合的凹槽，所述凹槽用于固定条状亲水薄膜。

总体而言，通过本发明所构思的以上技术方案与现有技术相比，由于通过疏水区域，将免疫印迹薄膜分隔为多个平行的条状亲水区域，能够取得下列有益效果：

1、在同一张免疫印迹薄膜上，可以检测多个目标抗体的样本，从而提高了平行检测的反应效率；

2、免疫印迹薄膜具有以疏水区域间隔的多个平行的条状亲水区域，通过亲水区域的吸附力与目标抗体结合，从而更加节省试剂，同时适用于痕量检测；

3、免疫印迹薄膜由于通过亲水区域的吸附力与目标抗体结合，从而使得所需的溶液量较少，简化了检测步骤，更适用于原位检测；

4、多个目标抗体的样本结合于同一张免疫印迹薄膜上，从而更适于在完全相同的条件下进行反应，更容易进行平行对照，提高了检测的准确率。

附图说明

图1为本发明实施例1俯视图；

图2为本发明实施例1制作过程示意图；

图3为本发明实施例2制作过程示意图；

图4为本发明实施例3制作过程示意图；