[发明专利]一种提高L-色氨酸产量的发酵工艺在审
申请号: | 201710188351.3 | 申请日: | 2017-03-27 |
公开(公告)号: | CN108660168A | 公开(公告)日: | 2018-10-16 |
发明(设计)人: | 李继安;林惠敏;宋乐;何强;徐鲁;夏爱坤;汪玉真;刘坤;张建斌;李亚军 | 申请(专利权)人: | 上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院 |
主分类号: | C12P13/22 | 分类号: | C12P13/22;C12R1/19 |
代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 薛琦;余化鹏 |
地址: | 200040 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 搅拌桨 色氨酸 发酵 尺寸增加 发酵工艺 发酵过程 基础发酵培养基 机械搅拌发酵罐 机械搅拌 搅拌转速 生产菌种 正常运作 发酵液 补料 桨叶 溶氧 生产能力 保证 | ||
1.一种提高L-色氨酸产量的发酵工艺,其特征在于,其包括如下步骤:将L-色氨酸的生产菌种置于含有基础发酵培养基的机械搅拌发酵罐中进行发酵,在发酵过程搅拌,搅拌转速为375转/分~600转/分,发酵过程中补料,至发酵结束;所述的机械搅拌发酵罐包含搅拌桨,相对标准搅拌桨的尺寸,所述的搅拌桨的尺寸:外直径尺寸增加100%~165%,桨叶的长度尺寸增加25%~150%。
2.如权利要求1所述的发酵工艺,其特征在于,所述外直径尺寸增加150%;
和/或,所述桨叶的长度尺寸增加50%;
和/或,所述的搅拌桨的桨叶宽度为宽度尺寸增加10%~65%,较佳地为宽度尺寸增加13%。
3.如权利要求1所述的发酵工艺,其特征在于,所述的机械搅拌发酵罐为25L的机械搅拌发酵罐,搅拌桨的尺寸如下述任一:
桨A:外直径13.89cm,桨叶长3.87cm,桨叶宽2.19cm,内直径2.18cm;
桨B:外直径12.00cm,桨叶长4.86cm,桨叶宽2.47cm,内直径2.18cm;
桨C:外直径12.64cm,桨叶长3.24cm,桨叶宽2.19cm,内直径2.18cm;
桨D:外直径14.47cm,桨叶长6.12cm,桨叶宽3.56cm,内直径2.18cm。
4.如权利要求1所述的发酵工艺,其特征在于,所述的搅拌桨是可拆卸的;
和/或,所述的搅拌转速为400转/分~500转/分,较佳地为420转/分~460转/分。
5.如权利要求1所述的发酵工艺,其特征在于,所述L-色氨酸的生产菌种为大肠杆菌(Escherichia coli),较佳地为中国工业微生物菌种保藏管理中心销售的大肠杆菌基因工程菌(Escherichia coli)CICC 20658。
6.如权利要求5所述的发酵工艺,其特征在于,所述的L-色氨酸的生产菌种在进行发酵前进行菌种的斜面培养与种子培养;
所述的斜面培养所用的培养基为斜面培养基;
所述的斜面培养基为:每升含胰蛋白胨10.0g,酵母浸出粉5.0g,氯化钠5.0g,琼脂20.0g,pH7.0~7.2,在使用前进行121℃灭菌15min;
所述的斜面培养的培养条件为:温度35.0℃,培养周期24h;
所述的种子培养所用的培养基为种子培养基;
所述的种子培养基为:每升含葡萄糖30.0g,酵母浸出粉1.5g,(NH4)2HPO4 2.5g,KCl1.5g,MgSO4 1.6g,柠檬酸钠1.6g,(NH4)2SO4 1.2g,FeSO4.7H2O 2.8mg,MnSO4.H2O 1.2mg,维生素B1 1.3mg,生物素0.3mg,pH6.8~7.1,在使用前进行121℃灭菌20min;
所述的种子培养的培养条件为:温度36℃,培养周期10~12h,pH6.8~7.1。
7.如权利要求5所述的发酵工艺,其特征在于,所述的L-色氨酸的生产菌种的基础发酵培养基中的氮源为质量比7:5的酵母粉和蛋白胨;所述的基础发酵培养基较佳地还包含0.5g/L的乙酸锌。
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