[发明专利]一种天然抗氧化剂灰喇叭菌多糖CCPP‑1及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种天然抗氧化剂灰喇叭菌多糖CCPP-1，其特征在于：所述灰喇叭菌多糖CCPP-1的分子量为1.85×10⁶Da，其单糖组成按摩尔比构成为葡萄糖：鼠李糖：甘露糖：木糖：葡萄糖醛酸＝0.47：0.05：1：0.86：0.006。

2.一种权利要求1所述的天然抗氧化剂灰喇叭菌多糖CCPP-1的制备方法，包括提取和分离纯化各单元过程，其特征在于所述提取过程包括如下步骤：

(1)称取100g灰喇叭菌子实体烘干粉碎并过80目筛得到粉料；

(2)将步骤(1)得到的粉料加入双蒸水中，75-85℃下浸提4h，提取三次，合并提取液并浓缩，离心后留取上清液；

(3)将步骤(2)得到的上清液加入95％的乙醇中，4℃静置8-12h，离心并收集沉淀物；

(4)将步骤(3)得到的沉淀物用双蒸水溶解，旋转蒸发仪旋蒸除去残留的乙醇，得到粗多糖溶液；向粗多糖溶液中加入Sevage试剂，体积比为3:1，磁力搅拌1小时，离心后保留上清液；Sevage试剂重复除蛋白5次，合并上清液，浓缩后于-80℃冷冻2h，冷冻后放入冻干机冻干，得到灰喇叭菌粗多糖。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

步骤(2)中，将步骤(1)得到的粉料加入双蒸水中时控制料液比为比1g：30mL。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

步骤(4)中，冻干机冻干参数为：温度-56℃，气压0.10mbar，时间2天。

5.一种权利要求1所述的天然抗氧化剂灰喇叭菌多糖CCPP-1的制备方法，包括提取和分离纯化各单元过程，其特征在于所述分离纯化过程包括如下步骤：

(1)将灰喇叭菌粗多糖用双蒸水配成10％的溶液，用DEAE-Sephorase F.F凝胶柱分离，上样量为10ml，0-1.5mol/L NaCl溶液梯度洗脱，流速为1ml/min，用AKTA仪器实时监测，透析后浓缩，-80℃冷冻2h，随后放入冻干机中冻干，得到组分1；

(2)将所得组分1用双蒸水配成0.1％的溶液，过0.22μm的过滤膜，用Superdex-75柱层析分离，双蒸水洗脱，流速1ml/min，用AKTA仪器实时监测，收集得到均一的灰喇叭菌多糖CCPP-1。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：

步骤(1)中，透析时使用3500Da的透析袋。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：

步骤(1)中，冻干机冻干参数为：温度-56℃，气压0.10mbar，时间2天。

8.一种权利要求1所述的天然抗氧化剂灰喇叭菌多糖CCPP-1的用途，其特征在于：所述灰喇叭菌多糖CCPP-1在食品、药品或化妆品领域作为抗氧化剂使用，对DPPH、羟基自由基具有显著的清除作用。