[发明专利]一种基于实时等温扩增的用于人乳头瘤病毒E6/E7基因检测的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种基于实时等温扩增的用于人乳头瘤病毒E6/E7基因检测的引物及探针，其特征在于，包括如下引物对和分子信标探针：

(1) 检测HPV16 的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1~2所示，检测HPV16 的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；

(2) 检测HPV18 的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.4~5所示，检测HPV18 的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；

(3) 检测HPV31的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.7~8所示，检测HPV31 的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示；

(4) 检测HPV33的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.10~11所示，检测HPV33 的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；

(5) 检测HPV35 的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.13~14示，检测HPV35 的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示；

(6) 检测HPV39 的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.16~17示，检测HPV39 的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示；

(7) 检测HPV45的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.19~20示，检测HPV45的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示；

(8) 检测HPV51的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.22~23示，检测HPV51的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.24所示；

(9) 检测HPV52的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.25~26示，检测HPV52的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.27所示；

(10) 检测HPV56的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.28~29示，检测HPV56的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.30所示；

(11) 检测HPV58的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.31~32示，检测HPV58的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.33所示；

(12) 检测HPV59的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.34~35示，检测HPV59 的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.36所示；

(13) 检测HPV66的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.37~38示，检测HPV66 的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.39所示；

(14) 检测HPV68的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO.40~41示，检测HPV68 的分子信标探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.42所示。

2.根据权利要求1所述的基于实时等温扩增的用于人乳头瘤病毒E6/E7基因检测的引物及探针，其特征在于，

检测HPV16、HPV18、HPV33、HPV39分子信标探针5’ 端为吲哚二羧菁Cy5标记；

检测HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58分子信标探针5’ 端为羧基荧光素FAM标记；

检测HPV31、HPV35、HPV59、HPV66、HPV68分子信标探针5’ 端为六氯荧光素HEX标记。

3.一种基于实时等温扩增的用于人乳头瘤病毒E6/E7基因检测的试剂盒，其特征在于，包括4×实时NASBA 反应液和5×酶混合液，所述4×实时NASBA 反应液中溶解有权利要求1所述的基于实时等温扩增的用于人乳头瘤病毒E6/E7基因检测的引物及探针，各引物、分子信标的浓度分别为0.8μM。