[发明专利]一种茄子单倍体植株加倍方法

说明书

技术领域

本发明属于植物育种或组织培养领域，具体涉及一种茄子单倍体植株加倍方法。

背景技术

茄子(Solarium melongena L)，原产亚洲热带，我国各省均有栽培。草本或亚灌木状，果可供蔬食，根、茎、叶、种子皆可入药。

近年发展起来的以组织培养和遗传工程为主导的生物技术,为缩短育种年限开辟了一条新途径。70年代初,Riana等成功地通过茄子花药培养经愈伤组织途径成苗，目前不论是茄子花药还是花粉(小孢子)培养，都已有许多成功的报道，但国内利用花药或花粉培养获得的亲本，选育出茄子新品种的报道却并不多。究其原因，主要是茄子花药或花粉培养产生再生植株的频率不高，且再生植株中的单倍体加倍频率不高，成熟的单倍体植株加倍困难。一般加倍方法是：采用一定浓度的秋水仙素溶液，处理比较幼嫩植株的生长点一定时间，成功的报道国内仅见于北京市农科院蔬菜所单倍体组，其加倍处理后的植株结实率最高的可达到87.5％，但加倍前植株是否均为单倍体，以及结实植株是否为二倍体则并未说明。笔者在加倍方法研究过程中，也采用了秋水仙素溶液滴生长点的处理方法，处理后枝条要么死亡，要么没有加倍成功，与其他茄子育种单位交流，普遍反应茄子单倍体植株处理生长点诱导加倍比较难以成功。

除了活体植株生长点诱导加倍方法外，组培过程中诱导生根苗或无根幼苗加倍、秋水仙素浸幼苗根或分蘖节法等也是常用的方法，但这些常用方法均存在同样的问题：一旦处理过程中造成苗死亡，则非但单倍体不能成功加倍，而且原有单倍体材料也会丢失。本发明在此基础上，对茄子单倍体植株开展离体诱导枝条加倍的技术研究，在保存原始材料的同时进行加倍，保证每一单倍体植株加倍成功，提高了茄子花药(粉)培养技术应用于育种实践的效率。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种茄子单倍体植株加倍方法，以解决现有技术存在的效果不佳等问题。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

一种茄子单倍体植株加倍方法，它包括如下步骤：

(1)采集单倍体茄子植株枝条，将基部约2cm浸入多菌灵溶液，再转入秋水仙素溶液中进行加倍处理；

(2)取步骤(1)中加倍处理后的枝条用水冲洗后，将基部剪成45度斜面，浸入IBA溶液中，再插入基质中；

(3)将步骤(2)中插入基质中的枝条用塑料薄膜密封后，进行光照培养，15～20天后即得加倍后的茄子扦插苗。

步骤(1)中，所述的单倍体茄子植株枝条的采集方法为：当单倍体茄子植株发育到四门斗开花时，将双干整枝留下的四个枝条，从分叉处向上留2-4片叶剪掉，待隐芽萌出的枝条达到10cm左右时，将枝条从底部剪下。

步骤(1)中，所述的多菌灵溶液由有效成分含量为50wt％的多菌灵可湿性粉剂与水按照1：500～800的质量比稀释得到；将基部浸入多菌灵溶液，浸泡时间为0.5～4h，优选0.5～2h。

步骤(1)中，所述的秋水仙素溶液的浓度为0.05～0.5wt％，所述的加倍处理的方法为将枝条基部浸入秋水仙素溶液中4～72h。

其中，优选的是，秋水仙素溶液的浓度为0.05wt％，浸泡时间为72h；或者秋水仙素溶液的浓度为0.2wt％，浸泡时间为5h。

步骤(2)中，所述的IBA溶液的浓度为500～1000ppm，枝条基部2cm在IBA溶液中的浸泡时间为1～10s。

步骤(2)中，所述的基质为蛭石或由蛭石、草灰和珍珠岩以5：4：1的体积比混合而成，厚度不小于10cm，浇透但不积水。

步骤(2)中，在基质中，枝条的插入深度为3～4cm，倾斜角度为30度，株行距为8cm。

步骤(3)中，所述的光照培养的温度为24～26℃，光周期为12～16h，暗周期为8～12h，光照强度为1000～1500lx。

步骤(3)中，前两周内不打开薄膜，两周后可打开薄膜，拔除未生根枝条并浇水后，重新盖好薄膜。

植株倍性鉴定及二次加倍处理：植株倍性鉴定采用分裂过程中染色体计数的方法，二倍体植株体细胞染色体数目为24条，花药中花粉量多，人工辅助自交后，多数能够结果并产生种子。

未加倍成功的植株，可以从原始单倍体植株上采集枝条再进行加倍处理，或从加倍未成功的单倍体上采集枝条进行二次加倍处理，直至该植株加倍成功为止。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优势：